黑曲霉产纤维素酶的分离纯化及性质研究

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论文是关于黑曲霉产纤维素酶系中内切β-葡聚糖苷酶的分离纯化及性质的研究。使用硫酸铵分级沉淀、Sephadex G100凝胶柱层析、DEAE FF弱阴离子交换柱层析后,从市售黑曲霉发酵粉中分离纯化得到一种内切β-葡聚糖苷酶组分,经SDS-PAGE电泳分析,该组分已达电泳纯,其分子量为26.4KD。 对内切β-葡聚糖苷酶酶学性质研究表明:该酶最适反应温度是55℃,最适pH为4.8,Lineweaver-Burk法求得动力学参数,Km和Vmax分别为6.838×10-3g/ml、2.906×10-2mg/(ml·min)。通过向该酶液中加入葡萄糖,研究其热稳定性、热力学函数的变化,探讨葡萄糖对其酶活力的保护作用机制。结果表明:葡萄糖可有效地保护内切β-葡聚糖苷酶活力。建立了葡萄糖增强内切β-葡聚糖苷酶热稳定性的动力学模型,并对该模型进行了验证。同时根据热力学模型计算出的热力学函数熵和焓值的降低也进一步证实了葡萄糖可提高内切β-葡聚糖苷酶的热稳定性。
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