【摘 要】
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目的:采用八臂迷宫,HE染色法及免疫印迹法对血管性轻度认知障碍大鼠的行为学改变及海马BDNF/TrkB因子表达的影响,探讨补肾益髓化痰通络法治疗血管性轻度认知障碍的效果,为Va MCI的中医药治疗作用机理以及中药的开发奠定基础。方法:1.选取40只SPF级的SD大鼠进行研究,随机将大鼠分为假手术组、模型组、中药组以及阳性对照组共4组,每组各10只。应用结扎大鼠右侧颈动脉联合半高脂饲料喂食的方式,在
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目的:采用八臂迷宫,HE染色法及免疫印迹法对血管性轻度认知障碍大鼠的行为学改变及海马BDNF/TrkB因子表达的影响,探讨补肾益髓化痰通络法治疗血管性轻度认知障碍的效果,为Va MCI的中医药治疗作用机理以及中药的开发奠定基础。方法:1.选取40只SPF级的SD大鼠进行研究,随机将大鼠分为假手术组、模型组、中药组以及阳性对照组共4组,每组各10只。应用结扎大鼠右侧颈动脉联合半高脂饲料喂食的方式,在周期为8周的研究时长基础上,对血管性轻度认知障碍的大鼠模型进行复制。通过形态学、分子生物学等实验手段研究补肾益髓化痰通络法对Va MCI的保护作用及作用机制。2.八臂迷宫实验:对大鼠发生工作记忆错误的次数以及吃完全部食物所用总时长进行测试。3.HE染色:对大鼠海马CA1区阻滞的形态学变化情况进行观察。4.蛋白印迹法（Western-Blot）:检测BDNF/TrkB蛋白的表达。结果:1.八臂迷宫:各组大鼠在八臂迷宫实验当中的表现,模型组与假手术组相比,大鼠记忆错误的次数显示增加（P＜0.01）,进入总次数减少,错误率增加,所需总时间增多。与模型组相比,各给药组错误次数均显示降低,进入总次数增多,错误率降低,所需总时间减少（P＜0.05）。2.HE染色:假手术组:大鼠海马组织CA1区神经元的结构十分完整,层次清晰且形态规则,排列顺序致密整齐,且分布较为均匀,不存在明显的神经元失的现模型组:大鼠海马组织CA1区神经元的结构略欠完整,层次较差且形态不规则,排列顺序稀疏紊乱,细胞间质的水肿现象较明显,细胞核出现固缩深染,神经元与其周围组织的间隙较宽,存在明显的神经元失的现象。中药组和尼莫地平组:大鼠海马组织CA1区神经元的结构相对完整,层次较为清晰且形态比较规则,排列顺序较为整齐,细胞间质出现的水肿明显程度不如模型组,细胞核的固缩减少,神经元于其周围组织的间隙缩小,神经元存在少量的丢失现象。如图5所示。3.根据Western Blot测定所得结果可知,模型组大鼠的海马BDNF/TrkB表达的降低量明显低于假手术组（p＜0.01）;相比于模型组大鼠,中药组与尼莫地平组大鼠海马BDNF/TrkB蛋白表达水平显著升高（p＜0.05）;且中药组及尼莫地平组大鼠海马BDNF蛋白表达水平差异有统计学意义（p＜0.05）,而两组间的TrkB蛋白表达水平差异无统计学意义（p＞0.05）。结论:1.补肾益髓化痰通络法可明显改善Va MCI大鼠学习及记忆等认知功能。2.补肾益髓化痰通络法能够有效改善Va MCI大鼠的组织病理结构,使海马神经元超微结构完整性得以被保护,同时有效修复神经元的损伤。3.补肾益髓化痰通络法能够增强海马BDNF/TrkB的表达,促进神经元损伤后修复。
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