【摘 要】
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背景及目的:研究发现宫颈癌与人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV),鼻咽癌与EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)密切相关。近年来的研究也表明,前列腺癌的发生发展也与多种
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背景及目的:研究发现宫颈癌与人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV),鼻咽癌与EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)密切相关。近年来的研究也表明,前列腺癌的发生发展也与多种病毒感染相关,其中较为重要的因子是人类疱疹病毒8型(human herpesvirus 8, HHV-8)。HHV-8又称卡波济肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi’s sarcoma-associated herpesvirus,KSHV),于1994年在艾滋病相关的卡波济肉瘤(acquired immunodeficiency syndrome-related Kaposi’s sarcoma, AIDS-KS)病损组织中首次被发现。v-FLIP(viral FLICE inhibitory protein)基因,又名K13基因,是一种HHV-8潜伏期表达基因,研究证实其对不同细胞的生长增殖起了不同的作用。本实验研究HHV-8 K13基因对内皮细胞及前列腺癌细胞增殖作用的影响。方法:采用分子克隆技术构建含K13基因的PEF-K13-Puro重组质粒并进行酶切鉴定和序列检测;PEF-K13-Puro重组质粒瞬时转染人血管内皮细胞系EA.HY926细胞和前列腺癌细胞系PC-3细胞,采用Western blot方法检测K13基因编码蛋白表达情况;分别运用流式细胞术和MTT方法检测K13基因编码蛋白对这两种细胞增殖的影响。结果:核酸序列分析结果表明,克隆的K13基因序列与GenBank中已登记的K13序列100%同源,K13基因编码蛋白能够在人血管内皮细胞和前列腺癌细胞中表达,流式细胞分析和MTT结果显示,K13基因编码蛋白对上述两种细胞的增值均有明显的抑制作用(P < 0.05)。结论:本研究表明,成功克隆HHV-8 K13基因,其编码蛋白可以明显抑制人血管内皮细胞和前列腺癌细胞的增殖。
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