广东紫珠苯乙醇苷提取富集工艺及大叶紫珠化学成分研究

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马鞭草科紫珠属(Callicarpa L.)植物在我国资源丰富,共有48种,主要分布于长江以南各省,该属植物具有重要药用价值,多具抗炎止血活性,临床和民间应用广泛。广东紫珠(C.kwangtungensis)和大叶紫珠(C.macrophylla)为该属两种代表性药用植物,均收录于中国药典。广东紫珠主要分布于江西、广东、广西等地,具有收敛止血、散瘀、清热解毒的功效,临床上主要用于治疗宫颈糜烂出血、阴道炎、宫颈炎等妇科炎症。该植物中含有多种活性成分,其中苯乙醇苷类成分备受关注,该类成分具有抗炎、抑菌、抗氧化等作用,与广东紫珠的药理作用密切相关,我们前期研究也表明,苯乙醇苷是广东紫珠的抗炎活性物质基础。大叶紫珠主要分布于贵州、广东、广西等地,具有散瘀止血消肿止痛的功效。已有研究表明大叶紫珠中含有萜类、黄酮类、苯丙素类成分,当前国内外对大叶紫珠的研究相对较少,其药效物质基础不够明确。为了更好地开发利用紫珠属药用植物,我们选广东紫珠和大叶紫珠作为研究对象,开展以下研究:1.广东紫珠苯乙醇苷提取工艺的研究考察了乙醇回流提取,超声提取,冷浸提取三种提取方法。最终选定乙醇回流提取方式。在单因素试验的基础上设计正交试验考察了乙醇浓度,提取时间,提取次数,料液比对苯乙醇苷得率的影响,最终确定最佳工艺为:乙醇浓度为90%,料液比为1:10,回流提取3次,每次1.0 h。该工艺的苯乙醇苷得率可达2.66%。2.广东紫珠苯乙醇苷富集工艺的研究通过对5种大孔吸附树脂的静态吸附特性的研究,确定了LS-300 B树脂是一种理想的吸附剂,适用于广东紫珠中苯乙醇苷的分离纯化。通过对LS-300 B树脂的动态吸附特性研究,确定了上样量,上样浓度,上样速度,洗脱剂比例,洗脱倍数等工艺参数。通过本工艺生产得到的苯乙醇苷纯度66%,苯乙醇苷转移率达80%以上。3.大叶紫珠化学成分研究对大叶紫珠60%乙醇提取物的化学成分进行了系统研究。经硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、ODS和制备液相色谱等多种分离方法对大叶紫珠的化学成分进行分离纯化,得到单体化合物16个,包括松香烷型二萜6个,黄酮类化合物5个,酚酸类化合物5个,通过理化性质和波谱分析鉴定(MS,1D-NMR,2D-NMR)为:β-细辛醚(1)、γ-细辛脑(2)、α-细辛醚(3)、对甲氧基苯甲酸(4)、Asaronaldehyde(5)、Angustanoic acid G(6)、1,2,3,4,4a,9,10,10a-octahydro-1,4a-dimethyl-7-(1-methylethenyl)-9-oxo-1-phenanthrenecarboxylic acid(7)、Macrophyllastic acid A(8)、Angustanoic acid E(9)、4-epi-dehydroabietic acid(10)、Angustanoic acid F(11)、(﹣)-乔松素(12)、5-羟基-3,7,4’-三甲氧基黄酮(13)、5-羟基-3,6,7,4’-四甲氧基黄酮(14)、(﹣)-球松素(15)、5-羟基-3,7,3’,4’-四甲氧基黄酮(16)。其中化合物8为新化合物;化合物1,2,3,4,5,6,7,9,10,11,12,15为从紫珠属植物中首次分离得到的化合物。化合物13,14,16为首次从大叶紫珠中分离得到的化合物。
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