颗粒附着态微生物在温瑞塘河中的群落结构及与氨氧化作用的相关性研究

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为了了解平原河网地区颗粒附着态微生物与浮游态微生物的丰度、多样性和群落结构的时空变化特征及与环境因子的关系,本文通过为期一年的野外采样调查对其进行探索,选取温瑞塘河周边四处不同类型区域——商业区、工业区、种植区和风景区(对照组)分别在夏、秋、冬、春四个季节进行样品采集,每个区域平行采3个样品。运用454焦磷酸测序、表面荧光计数法、DNA提取、实时荧光定量PCR和多元统计分析方法对温瑞塘河中的颗粒附着态和浮游态细菌的丰度、群落结构的时空异质性以及与环境因子的关系进行研究,得到如下结果:
  (1)温瑞塘河总体细菌平均值为1.06×107cells/mL,颗粒附着态细菌平均值为2.80×106cells/mL,浮游态细菌平均值为7.80×106cells/mL。细菌丰度有较明显的时空异质性,从空间上来看,颗粒附着态细菌在商业区和种植区数量较多,工业区和风景区数量较少;浮游态细菌数量是工业区和种植区较多,商业区和风景区较少。从季节上看,颗粒附着态细菌数量是在夏季和冬季较多,春季和秋季较少;浮游态细菌数量是春季较多,其次为夏季和秋季,冬季较少。
  (2)颗粒附着态微生物的多样性高于浮游态微生物。空间分布上,颗粒附着态和浮游态微生物多样性均风景区高,工业区低。季节分布上,颗粒附着态和浮游态微生物多样性均秋季高,春季低。97%相识度聚类得到5709个OTU,分布于9个优势门中,其中比例较高的门为变形菌门、拟杆菌门、放线菌门和蓝藻细菌。比例超多1%的属有9个,分别为C39、多核杆菌属、Limnohabitans、沉积物杆状菌属、Fluviicola、黄杆菌属、不动杆菌属、聚球藻属和Dolichospermum。同时检测出了氨氧化微生物亚硝化螺菌属和一些致病菌属。PCA分析结果表明受环境因子不同的影响,颗粒附着态微生物和浮游态微生物的群落结构具有一定的时空差异,RDA分析结果表明影响颗粒附着态微生物群落结构的主要环境因子为DO、pH、TN、TP、NH4+、NO3-、NO2-、TOC、SS和Chla;影响浮游态微生物群落结构的主要环境因子为Temp、pH、DO、TN、TP、NH4+、NO3-、NO2-和TOC。
  (3)温瑞塘河中的氨氧化微生物分布特征具有一定的时空异质性。AOA的数量高于AOB,证明在该河中AOA为主要的氨氧化微生物。浮游态氨氧化微生物的丰度高于颗粒附着态氨氧化微生物。空间上,AOA主要分布在商业区,AOB主要分布在工业区。季节上,氨氧化微生物主要分布在春季。浮游态氨氧化微生物氨氧化速率较高,并与AOA的丰度呈极显著正相关(P<0.01)。AOB的氨氧化速率高于AOA,并且颗粒附着态AOB与总速率显著相关(P<0.05),说明AOB活性更高,并提示了颗粒相关微生物的重要性。
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