论文部分内容阅读
研究背景及目的过敏性紫癜(Henoch-Schonlein’s purpura,HSP)是儿童时期一种常见的系统性血管炎疾病,伴有肾脏受累时称紫癜性肾炎(Henoch-Schonlein’s purpura nephritis,HSPN),其病因和发病机制尚未完全阐明。大量文献研究表明,补体系统的激活参与了HSP和HSPN的发生发展。C3是血浆中浓度最高的补体成分,是三条补体激活途径的共同组成成份,C4是补体经典激活途径的重要组成成分。血液中补体受体1(complement receptor 1,CR1,也称CD35)约85%表达于红细胞表面,可以黏附免疫复合物转移至肝、脾被巨噬细胞清除,此效应是机体清除循环免疫复合物的重要机制。同时CD35分子是重要的补体受体分子,能与补体激活过程中所形成的活性片段相结合,介导多种生物学效应。C4结合蛋白(C4binding protein,C4bp)是重要的补体调节蛋白,通过调节补体激活途径中关键酶而控制补体活化强度和范围。CD35和C4bp均可阻断C3转化酶C4b2a形成,或使已形成的C4b2a灭活,从而调控补体经典途径的活化。本研究通过检测HSPN患儿血和肾脏组织中CD35、C4bp的表达情况,探讨其与肾脏病理损害的联系,进一步明确红细胞免疫功能及补体系统在HSPN发生发展中的作用,从而为HSPN的防治提供新的科学实验依据。方法选取2012年12月至2014年10月在郑州大学第一附属医院儿内科诊断为HSP的70例患儿为研究对象,其中HSP无肾脏损害组30例(HSP组,n=30例),HSP肾脏损害组40例(HSPN组,n=40例)。同时选取20例我院健康体检同龄儿童为正常健康对照组(正常健康对照组,n=20例),5例因外伤肾切除的组织作为正常对照组(正常对照组,n=5例)。采用流式细胞术检测各组红细胞膜CD35表达水平;应用速率散射比浊法检测各组血清中补体C3、C4的含量;采用ELISA法检测各组血C4bp、循环免疫复合物(circulating immune complexes,CIC)的水平;采用免疫组化法检测40例HSPN患儿肾活检石蜡包埋组织CD35和C4bp的表达。结果1.HSPN组、HSP组及正常健康对照组血清C3水平比较,差异无统计学意义(F=2.472,P>0.05);HSPN组、HSP组及正常健康对照组血清C4水平比较,差异无统计学意义(F=2.579,P>0.05);HSPN组及HSP组红细胞表面分子CD35平均荧光强度均显著低于正常健康对照组,差异有统计学意义(F=10.510,P<0.05),同时HSPN组也低于HSP组,但差异无统计学意义(P>0.05);HSPN组及HSP组血清C4bp水平均显著高于正常健康对照组(x2=9.582,P<0.05),同时HSPN组与HSP组比较差异有统计学意义(Z=-2.007,P<0.05);HSPN组及HSP组血清CIC水平均显著高于正常健康对照组(x2=6.545,P<0.001),同时HSPN组与HSP组比较差异有统计学意义(Z=-2.053,P<0.05)。2.正常对照组肾小球上皮细胞可见斑片状CD35表达,肾小管和肾间质CD35的表达多为阴性;HSPN组患儿肾小球CD35呈斑点状表达,肾小管和肾间质CD35的表达均为阴性。HSPN组患儿肾组织CD35表达水平显著低于正常对照组,且随病理级别增加而减弱(F=14.626,P<0.05)。3.正常对照组肾组织中肾小球、肾小管和肾间质C4bp的表达多为阴性,偶有个别肾小球、肾小管及肾间质中可见散在的C4bp少量表达;HSPN患儿肾小球、肾小管及肾间质均可见斑点状分布的C4bp阳性表达。HSPN患儿肾组织C4bp表达水平显著高于正常对照组,且随病理级别增加而增强(F=18.907,P<0.05)。4.HSPN组患儿中,红细胞膜CD35水平与肾脏CD35表达强度呈显著正相关(r=0.489,P<0.01);与肾脏病理级别呈显著负相关(r=-0.615,P<0.01);肾脏CD35表达强度与肾脏病理级别也呈显著负相关(r=-0.386,P<0.05)。5.HSPN组患儿中,血C4bp水平与肾脏C4bp表达强度无相关(P>0.05);与肾脏病理级别无相关(P>0.05);而肾脏C4bp表达强度与肾脏病理级别显著正相关(r=0.528,P<0.05)。结论1.儿童HSPN的发生、发展过程中存在红细胞膜上CD35及肾组织CD35的表达水平下降,CD35可能参与了儿童HSPN的发病机制。2.儿童HSPN的发生、发展过程中存在血清C4bp及肾组织C4bp的表达水平升高,C4bp也可能参与了儿童HSPN的发病机制。3.监测红细胞膜CD35水平可间接反应肾组织中CD35的表达情况和肾损伤的程度。