论文部分内容阅读
研究背景：强直性脊柱炎(Ankylosing Spondylitis, AS)是以骶髂关节和脊柱附着点炎症为主要症状的一种慢性进行性炎性疾病,与HLA-B27呈强关联,属自身免疫性疾病,可造成脊柱畸形等关节病变表现以及心、眼、耳、肺、肾、神经等关节外病变表现,严重情况下患者可以失去劳动能力。越来越多的研究认为AS的发生受到遗传因素和环境因素的影响,是二者共同作用的结果,其中遗传因素与AS的关系最为密切。已有研究发现基因多态性与AS易感性之间存在相关性,但是BMP-2与FGF-2基因多态性在AS发病机理中的作用并未见报道。因此,本研究旨在分析BMP-2与FGF-2基因多态性与AS易感性之间的关系。方法：从北京地区选取124名AS患者和132名健康人,进行病例对照研究。病例组和对照组在年龄和性别上相匹配。所有AS病例的诊断都符合1984年修订的纽约标准。BMP-2和FGF-2基因多态性分析采用PCR-直接测序的方法。采用相对危险值(Odds ratio, OR)和95%置信区问(95%CI)来衡量BMP-2、FGF-2基因多态性与强直性脊柱炎易感性之间的关系。采用χ2方法计算OR和95%CI。对照组中哈迪-温伯格平衡的计算也是采用x2方法。酶联免疫(ELISA)法测定BMP-2与FGF-2蛋白含量。t检验来衡量病例组和对照组在BMP-2和FGF-2蛋白表达水平上的差异。体外实验测定BMP-2与FGF-2对成骨细胞增殖的影响。结果：BMP-2基因Lys25Ser多态性位点与AS的患病风险显著相关(OR=2.600,95%CI=1.163-5.812)。碱基A也可增加强直性脊柱炎的患病风险(OR=1.689,95%CI=1.151-2.479)。对于FGF-2基因754C/G多态性位点来说,CG和CC基因型为强直性脊柱炎的易感基因型(OR=2.132,95%CI=1.200-3.787；OR=3.760,95%CI=1.619-8.733),C等位基因携带者更容易患强直性脊柱炎(OR=1.752,95%CI=1.229-2.498)Lys 25Ser多态性位点的基因型对BMP-2的表达具有显著影响。携带有AA基因型的患者BMP-2蛋白表达含量最高,其次为CA基因型,CC基因型对应的蛋白表达含量最低,差异达到显著水平(P<0.05)。而Arg190Ser和Ser87Ser多态性位点对BMP-2蛋白表达没有显著影响。对于FGF-2的表达来说,携带有CC基因型(754C/G)的患者FGF-2蛋白表达含量最高(P<0.05),CG和GG基因型对应的蛋白表达含量较低。BMP-2处理成骨细胞,在72h后测定培养液的吸光度。与对照组相比,A1、A2与A3处理组的吸光度并没有达到显著增加(P>0.05)。但是A5处理组中吸光度显著增加,高于其余处理组(P<0.05)。A+B处理组的吸光度明显高于A5处理组(P<0.05)。FGF-2处理成骨细胞后,与对照组相比,B1、B2与B3处理组的吸光度没有明显变化(P>0.05)。B5处理组吸光度值明显高于B4(P<0.05),但是低于A+B处理组(P<0.05)。以上结果表明,在FGF-2与BMP-2蛋白的共同处理下,成骨细胞的增值率明显高于FGF-2蛋白与BMP-2蛋白的单独处理。结论：本研究获得的结论可以概括为以下几点：1.BMP-2基因多态性与AS易感性之间存在相关性。2.FGF-2基因多态性与AS易感性之间存在相关性。3.BMP-2蛋白的表达受多态性位点的影响。4.FGF-2蛋白的表达受多态性位点的影响。5.体外实验表明,BMP-2与FGF-2蛋白可促进成骨细胞的增殖。