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骨组织工程支架在临床治疗骨缺损和骨疾病有着很重要的应用。羟基磷灰石是人体骨组织主要的钙磷化合物,也是骨组织工程最常用的材料之一。然而单纯的羟基磷灰石无法满足造血,促进成骨的生物学性能,也不能促进组织工程血管化,以及抑制免疫排斥反应,不能满足人体骨组织的要求。研究发现,当归多糖有促进细胞增殖、促血管生成、抗炎等活性。所以本文将两者结合起来,制备骨组织工程支架,研究其用于骨组织工程研究的可行性。本文先是通过传统的水提醇沉法制备得到当归多糖(APS),分离纯化出其组分,进行抗氧化研究。再通过沉淀法制备羟基磷灰石以及反相乳液法制备当归多糖/壳聚糖/羟基磷灰石复合微球,借助复合微球来缓释其中的当归多糖成分;将复合微球与羟基磷灰石结合,制成磷酸钙骨水泥,优化其制备工艺,并进行表征。最后建立皮质口袋缺损和胫骨骨缺损动物模型,通过组织病理学观察骨水泥的组织相容性。实验结果显示,当归多糖提取率为12.6%,经DEAE-cellulose 52纤维素柱和Sephadex G-50色谱柱分离出APS1a,APS1b和APS2c。在0.5 mg/mL多糖浓度下,APS2c对羟基自由基和DPPH自由基的清除率分别为63.08±0.962%和93.31±1.587%;APS对DPPH自由基的清除率为95.92±0.936%,其总还原力吸光度高于其他当归多糖,测定为1.332±0.136。APS和APS2c的抗氧化能力都比较好,最终选取APS作为后续研究使用。复合微球在制备过程中交联搅拌速度达到500r/min下制得的形状规则,大小较均匀,其载药量为32.9%,包埋率为78.4%。测试其体外释放多糖量在第一天最多,达到1.028±0.095μg;释放量随着时间增加而减少,第2天到第14天的释放趋于稳定。测试成型后的羟基磷灰石-复合微球支架(HAp-CMs)和羟基磷灰石支架(HAp)的抗压强度分别为17±3.5MPa,18±1.1MPa,第28天HAp-CMs的降解率为11.54±1.03%,比HAp的8.66±0.41%更快。通过扫描电子显微镜发现植入前的复合支架呈无规则的片状,结构较紧密;植入后的支架产生大量微孔结构,比表面积增加,利于细胞附着。在第4周的皮质口袋缺损实验中,发现HAp-CMs比HAp的细胞增值速度快,降解快,并以缓释当归多糖的微球作为聚集点,吸引大量细胞在其周围增殖;同时在HAp-CMs支架内形成一定数量的血管,管腔内带有呈双面凹圆盘状的红细胞。在胫骨骨缺损实验中,HAp-CMs仍能够促进血管化形成,并诱导骨细胞生长。综上所述,当归多糖/羟基磷灰石复合材料可以用来制备骨组织工程支架,具有较好的应用前景。