目的:探索环磷酰胺、顺铂、阿霉素三药联合化疗产生药效和毒副作用的时间依从性,据此确定最佳给药时间,为临床肿瘤化疗提供更优化给药方案。方法:小鼠在同一时间接种肉瘤S₁₈₀后,按昼夜六个不同时间点（10:00、14:00、18:00、22:00、02:00、06:00 h）分别给予环磷酰胺(20mg·kg^-1)、顺铂(1mg·kg^-1)和阿霉素(1mg·kg^-1),阿霉素每隔两天给一次（CAP联合化疗）。考察三种药物联合应用后,药效及毒性反应的昼夜节律变化。以瘤重、肿瘤细胞周期分布、肿瘤细胞凋亡相关蛋白p53、Bcl-2、Bax表达为联合化疗的药效评价指标。以体重、外周血象代表化疗动物整体情况;以骨髓细胞周期分布、骨髓细胞凋亡相关蛋白caspase-3活性、血浆G-CSF水平反映骨髓毒性,以血浆肌酐和尿素氮水平评价肾毒性;以血浆肌酸激酶、乳酸脱氢酶水平、心肌细胞形态学变化、α-actin表达反映心脏毒性。经免疫组化、western blotting、流式细胞技术测定上述指标,并用余弦节律统计法对数据进行分析。结果:CAP联合化疗对肿瘤的抑制作用在各个时间均能发挥,在02:00 h给药作用最强。联合化疗后其DNA合成能力下降,其峰值在18:00h,谷值在14:00 h。联合化疗后肿瘤细胞凋亡相关蛋白p53、Bcl-2的表达水平有所增加,Bax的表达水平有所下降,其中p53在18:00-22:00 h增加最显著,而Bcl-2和Bax在02:00-10:00 h降低最显著。联合化疗对白细胞抑制作用在10:00-14:00 h最显著。联合化疗使血浆G-CSF含量降低,在02:00 h最显著。骨髓细胞周期表明,给药后骨髓细胞出现sub-G₁峰,凋亡现象在02:00 h和10:00 h最显著;同时G₁与S期比例下降,表明骨髓细胞DNA合成能力下降。联合化疗组骨髓细胞Caspase-3出现了19KD的活化片段,并且具有时间依赖性,在02:00-10:00 h最显著。肌酐、尿素氮、乳酸脱氢酶、肌酸激酶在实验期间的变化不明显,但是心肌的病理切片上可见心肌细胞断裂,心肌细胞α-actin的表达水平在14:00 h降低幅度最大。结论:CAP联合化疗的药效在22:00-02:00 h最好、在10:00-14:00 h最差。毒性反应在06:00-14:00 h最大、在18:00-22:00 h最小。