高效杀蚊苏云金芽孢杆菌BRC-LLP29的发酵优化

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苏云金芽孢杆菌BRC-LLP29为新型高效杀蚊菌株,应用快速有效的数学统计方法对其杀蚊毒力的发酵培养进行优化。首先进行发酵培养基优化,通过单因素筛选确定最佳碳源为葡萄糖、麦芽糖、可溶性淀粉,氮源为typetone、大豆蛋白胨、干酪素;最佳金属离子为Mg2+、Al3+。采用二水平Plackett-Burman设计对影响毒力的8因素进行显著性筛选,获得培养基成分中3个重要影响因子:葡萄糖、干酪素和Al2(SO4)3;运用爬坡路径法对这3种因子进行试验,获得3种重要因子的最适浓度范围;通过响应面分析法得到3个重要因子的交互作用和最佳条件,确定BRC-LLP29菌株最佳毒力水平的发酵培养基为:葡萄糖19.8 g/L、干酪素28.4 g/L、Al2(SO4)3 1.2 g/L、MgSO4·7H2O 2 g/L、K2HPO4 3 g/L、CaCO3 0.5 g/L,优化后毒力水平达到致死率61.11%,与响应面数学模型的预测值只有5.91%的误差。发酵条件优化结果表明为:发酵温度为31℃,发酵初始pH为7.0,摇瓶装量为40mL/250mL三角瓶,每瓶的接种量为3.5%,发酵72h,对致倦库蚊最终致死率达到最高为83.33%。
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