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本文建立了高效液相色谱法(HPLC)同时检测黄鳝(Monopterus albus)血浆及各组织中氟苯尼考和氟苯尼考胺的方法,并以此方法研究了25℃水温条件下单次口灌和肌肉注射氟苯尼考在健康黄鳝体内的药物动力学特征和多次口灌给药后氟苯尼考的残留消除规律。1.建立了反相高效液相色谱同时检测黄鳝血浆和肝脏、肾脏、肌肉中氟苯尼考及其主要代谢物氟苯尼考胺含量的方法。该方法以丙酮为萃取剂,正己烷去脂,乙腈-磷酸二氢钠缓冲液(30/70, V/V)为流动相,检测波长为225nm,柱温为40℃,流速1.0mL/min,采用Agilent1200型高效液相色谱仪检测。结果显示,在0.05-25.00μg/mL浓度范围内,标准曲线线性关系良好。氟苯尼考和氟苯尼考胺在血浆和各组织中的平均回收率分别为86.11%～92.08%和85.80%～91.23%。各组织中氟苯尼考和氟苯尼考胺的检测限为0.01～0.03μg/g。2.研究了25℃水温条件下,以20mg/(kg·bw)(?)勺剂量分别采用单次口灌和肌肉注射方式给药后,氟苯尼考和氟苯尼考胺在黄鳝体内的药物动力学和组织分布特征。结果显示,单次口灌给药后,氟苯尼考在黄鳝血液和组织中的药时曲线均表现出明显的双峰现象,且在整个实验中氟苯尼考的浓度均大于氟苯尼考胺的浓度。在血液中,氟苯尼考浓度分别在给药后5h和15h时达到峰值,分别为8.37mg/L(?)14.64mg/L。在黄鳝的各个组织中,氟苯尼考在肾脏中的吸收速率最快,达峰时间(Tmax)为2h,随后是肝脏和肌肉。氟苯尼考在黄鳝血液中的消除较为迅速,消除半衰期(t1/2β)为13.46h。氟苯尼考在肝脏、肾脏和肌肉组织中的t1/2β分别为18.68、26.97和18.48h。肾脏中氟苯尼考的曲线下面积(AUC)最大,为344.75mg-h/kg。氟苯尼考胺在黄鳝体内的消除速率明显慢于氟苯尼考,其代谢率范围为38.79%44.46%。单次肌肉注射给药后,氟苯尼考在黄鳝中吸收迅速,血液、肝脏、肾脏和肌肉中J的Cmax和Tmax分别为10.83mg/L、8.35、9.45、8.30mg/kg和7、7、3、11h。氟苯尼考黄鳝血液中的t1/2β为18.39h。黄鳝各组织中t1/2β的顺序为肾脏(27.29h)>肌肉(25.77h)>肝脏(23.82h)。肌肉注射后氟苯尼考胺在黄鳝体内的消除速率也明显慢于氟苯尼考,其代谢率范围为23.30%～35.21%。氟苯尼考在肝脏、肾脏和肌肉中的平均滞留时间(MRT)分别为31.18、39.27和37.51h。3.研究了25℃水温条件下以20mg/kg/d的剂量连续3d口灌给药后,氟苯尼考及其主要代谢物氟苯尼考胺在黄鳝肌肉、肝脏和肾脏中的残留规律。将氟苯尼考和氟苯尼考胺浓度之和作为动物性食品中氟苯尼考残留的标示残留物。氟苯尼考和氟苯尼考胺在黄鳝体内消除较慢,半衰期较长,在黄鳝肌肉、肝脏和肾脏中标示残留物的半衰期分别为31.63、38.82和35.02h。本实验分别以日本(0.1mg/kg)和欧盟(1mg/kg)规定的最高残留限量为标准计算休药期(WDT),得到黄鳝肌肉、肝脏和肾脏的WDT1和WDT2分别为10.63、9.62、11.77d和5.84、5.26、6.44d。若以肾脏作为残留监控的靶组织,建议在25℃水温条件下连续3d以20mg/kg的剂量口服氟苯尼考后,休药期为12d。