本论文对动物食品中庆大霉素残留的酶联免疫检测方法进行了系统研究。采用碳化二亚胺法将庆大霉素与钥孔嘁血蓝蛋白连接制得免疫原免疫兔子,免疫亲和柱纯化血清得到高效价和高特异性的庆大霉素多克隆抗体。采用碳二亚胺法与辣根过氧化物酶连接制得酶标抗原,建立了一种省时且高灵敏度的直接竞争ELISA检测方法,对影响实验的各因素(包被量,离子强度,pH值等)进行了优化与研究,包被量为0.5μg/孔,离子强度为0.01mol/L的PBS,pH为8.5时所获得的标准曲线灵敏度最高,稳定性最好。本实验所建立方法的灵敏度(IC50)为0.3gg/L,最低检出限(IC15)为0.03μg/L。对西索米星的交叉反应率为52.5%,对其他几种结构类似的氨基糖苷类抗生素交叉反应率较低。对牛奶、牛肉、猪肉、猪肝、猪肾、鸡肉、鱼肉、鸡蛋中的庆大霉素残留进行检测。牛奶基质：离心,弃去脂肪,7.5%的三氯乙酸提取离心后稀释100倍。组织基质：组织切碎样品用7.5%的三氯乙酸2倍提取离心后稀释50倍。鸡蛋基质：蛋清和蛋黄充分搅匀,用7.5%的三氯乙酸5倍提取离心后稀释20倍。不需要任何有机溶剂和前处理,添加三个不同浓度的庆大霉素兽药,回收率可达到69%～118%。本实验所建立方法在牛奶中检出限为3μg/L,在其它样品中检出限为3μg/kg。板内变异和板间变异均小于20%。以上证明本实验所建立的方法具有很高的准确性和精密度,满足快速检测的要求。通过37℃加速实验对抗体和酶标抗原的稳定性进行了研究,37℃存放3天后进行ELISA实验,标准曲线没有发生明显变化。通过与国外试剂盒的对比,本实验所建立的方法具有更高的灵敏度。