VEGF-C在鼻咽癌中的表达及其对人淋巴管内皮细胞生物学行为的影响

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目的:检测VEGF-C蛋白在鼻咽癌肿瘤组织中的表达及VEGF-C对人淋巴管内皮细胞生物学行为的影响,分析VEGF-C表达与鼻咽癌临床病理特征的关系,探讨鼻咽癌淋巴转移的机制,为鼻咽癌预后评估寻找新的指标并试图为探寻抗鼻咽癌淋巴转移的治疗手段提供思路。方法:第一部分:1)按实验入组条件搜集实验对象并进行分组;2)免疫组化染色(SP法)检测VEGF-C蛋白的表达;3)统计软件SPSS19.0统计分析实验结果。第二部分:1)体外培养人淋巴管内皮细胞;2)电穿孔法转染质粒;3)将实验对象分为三组:未处理的人淋巴管内皮细胞组、转染空载质粒PCI-neo人淋巴管内皮细胞组和转染重组质粒PCI-neoanti-VEGF-C人淋巴管内皮细胞组;3)蛋白印迹法检测三组人淋巴管内皮细胞VEGF-C的表达情况;4)MTT法、细胞划痕实验、细胞侵袭实验、流式细胞术分别检测三组人淋巴管内皮细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡情况;5)统计软件SPSS19.0对实验结果进行统计学分析。结果:第一部分:1)鼻咽癌肿瘤组织中VEGF-C蛋白表达阳性率高于正常鼻咽黏膜组织,其差别具有统计学意义(P<0.05);2)有淋巴结转移组鼻咽癌肿瘤组织中的VEGF-C蛋白阳性表达率明显高于无淋巴结转移组鼻咽癌肿瘤组织,其差别具有统计学意义(P<0.05);3)Ⅳ期鼻咽癌肿瘤组织中VEGF-C蛋白阳性表达率高于Ⅱ、Ⅲ期鼻咽癌,其差别具有统计学意义(P<0.05);4)非角化未分化型癌肿瘤组织中VEGF-C阳性表达率高于非角化分化型癌,其差别具有统计学意义(P<0.05),角化型癌与非角化型癌VEGF-C阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05)。第二部分:1)三组人淋巴管内皮细胞中都有VEGF-C蛋白表达,但是表达水平有差异,VEGF-C蛋白在转染重组质粒PCI-neoanti-VEGF-C的人淋巴管内皮细胞株中表达水平要明显高于空载质粒PCI-neo人淋巴管内皮细胞组和未处理的人淋巴管内皮细胞组,差异有统计学意义(P<0.05),而后面两组人淋巴管内皮细胞中的VEGF-C含量差别却无统计学意义(P>0.05);2)转染重组质粒PCI-neo-anti-VEGF-C的人淋巴管内皮细胞组增殖、迁移和侵袭能力均高于转染空载质粒PCI-neo的人淋巴管内皮细胞组和未处理的人淋巴管内皮细胞组,差异有统计学意义(P<0.05),而后面两组人淋巴管内皮细胞增殖、迁移和侵袭能力差异均无统计学意义(P>0.05);3)转染重组质粒PCI-neo-anti-VEGF-C的人淋巴管内皮细胞组凋亡率低于转染空载质粒PCI-neo的人淋巴管内皮细胞组和未处理的人淋巴管内皮细胞组,差异有统计学意义(P<0.05),而后面两组人淋巴管内皮细胞凋亡率不存在统计学差异(P>0.05)。结论:1)VEGF-C的表达与鼻咽癌的淋巴结转移、临床分期、分化程度存在相关性,为鼻咽癌的治疗及预后评估提供了新的参考依据和指标;2)VEGF-C促进鼻咽癌淋巴转移可能与其增强人淋巴管内皮细胞增殖、迁移和侵袭,抑制其凋亡有关。
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