【摘 要】
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目的:探讨与骨髓基质HS-5细胞直接接触对HEL白血病细胞耐药性的诱发作用及其机制。方法:采用人急性红白血病HEL细胞株与骨髓基质HS-5细胞共培养模式模拟体内白血病细胞及其周围
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目的:探讨与骨髓基质HS-5细胞直接接触对HEL白血病细胞耐药性的诱发作用及其机制。方法:采用人急性红白血病HEL细胞株与骨髓基质HS-5细胞共培养模式模拟体内白血病细胞及其周围的造血微环境,应用CCK-8法检测HEL细胞对Ara-c,DNR,VP16,MTX化疗药物的敏感性,流式细胞术检测HEL细胞周期时相分布, Real-time RT-PCR方法检测p19、p21、p27、MDR1、ABCG2、bcl-2基因的mRNA表达,Western Blot方法检测t-Akt、p-AktSer473、p-GSK3βSer9、p-STAT3Tyr705、Bcl-2、cleaved-Notch1V1754及Hes1蛋白表达。结果:与HS-5细胞共培养后的HEL细胞对四种化疗药物的敏感性均显著降低。在共培养24h时,HEL细胞阻滞于G0/G1期,G0/G1期的细胞比例明显增多。PCR结果显示p21基因的转录水平随着共培养时间的延长逐渐上调;p19基因的mRNA水平在12h时明显下调,随后又恢复;其它基因的改变均无统计学意义。Western Blot结果表明共培养后HEL细胞的p-AktSer473、p-GSK3βSer9、cleaved-Notch1V1754蛋白及Bcl-2蛋白表达上调,Hes1蛋白表达下调,p-STAT3Tyr705表达无明显变化。结论:与骨髓基质HS-5细胞的直接接触可增强HEL细胞对化疗药物的抵抗作用。本研究结果将有助于揭示骨髓微环境对白血病细胞耐药的保护机制,为探索以阻断二者相互作用为靶标的白血病治疗药物的研制奠定理论基础。
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