两份水稻早抽穗突变体em61、em148的MutMap克隆及基因表达分析

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xd5357
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
水稻(Oryza sativa L.)作为最重要的粮食作物之一,在粮食安全中具有举足轻重的地位。抽穗期是水稻的重要农艺性状,对其调控机制的研究能够为培育广适、高产水稻品种提供理论和材料基础。研究表明,水稻成花转换过程受到了多变的环境因子和自身复杂基因网络的共同调控和影响,而这一过程还有待进一步研究。本研究利用化学诱变剂甲基磺酸乙酯(EMS)对粳稻品种日本晴的晚抽穗突变体lvpl(Lo g Vegetative Phase1)进行大规模的诱变处理,通过筛选、鉴定,从突变体库中获得2份早抽穗突变体em148和em61,将两份材料分别与野生型日本晴杂交,构建EM148单基因突变株系e148和EM61单基因突变株系e61,对突变体的形态特征和主要农艺性状进行观察比较,通过遗传分析、MutMap克隆、测序验证及突变位点分析,克隆了 em148和em61的突变基因,同时对em61和e61中抽穗期相关基因的24小时节律表达情况进行了分析,主要研究结果如下:1、对em148和e148的抽穗期和主要农艺性状进行了系统的调查比较发现,二者的抽穗期分别比各自对照(lvpl和日本晴)显著提早28 d和20 d。遗传分析表明em148早抽穗的突变性状受一对隐性核基因控制。通过MutMap技术,即在em148/lvp1的F2群体中,对早抽穗单株DNA混池和迟抽穗对照DNA混池的重测序结果进行比对,通过分析两者之间单核苷酸多态性(SNP)差异以及与突变基因之间的连锁关系,最终将突变基因定位于水稻第3染色体短臂10 M-13 M区间内,在该区间内没有发现任何已报道的水稻抽穗期基因,对定位区域内发生突变的候选基因进行筛选和测序验证,发现了一个编码转录因子蛋白的基因,推测其与抽穗期相关,暂命名为EM148五在em148中,转录因子基因EM148的CDS第626位碱基胸腺嘧啶(T)突变为胞嘧啶(C),为错义突变,所编码密码子由丝氨酸(Ser)突变为甘氨酸(Gly)。为验证所克隆基因的正确性,进而对该基因进了功能互补、RNAi干涉和CRISPR敲除转基因验证。同时,对该基因的组织表达模式进行了研究,发现该基因在营养生长阶段表达量明显高于生殖生长时期,暗示其在水稻开花转换中的重要作用。2、对em61以及e61进行了系统的抽穗期调查和主要农艺性状的比较,二者的抽穗期分别比各自对照亲本(lvp1和日本晴)显著提早23d和15 d。在前期的工作中,已经完成对em61突变基因的克隆,发现EM61很可能是己报道基因Se14的等位基因。对野生型亲本日本晴、lvp1、em61、e61中抽穗期相关基因SDG724、Se14、Hd1、Ehd1、Hd3a和RFT1的表达情况进行检测,结果表明长日照条件下,EM61通过抑制Ehd1、Hd3a、RFT1的表达量来抑制水稻抽穗;在双突变体em61中,突变的EM61可以部分回复lvp1中抽穗期相关基因的表达量,从而导致em61开花期的提早,部分恢复了lvp1的抽穗期。此外,em61和e61还表现出植株稍矮、叶夹角变小、穗颈缩短等表型,荧光定量PCR分析发现,BR途径相关基因如D11、D2、BU1、BRI1在em61和e61中的表达量显著下降,暗示了 EM61很可能参与了 BR调控途径,从而影响水稻的生长发育过程。
其他文献
随着教育体系的改革,当前初中生都选择寄宿。很多寄宿生产生依赖的心理,对自身要求逐渐放低,给身心健康带来挑战。如何在学习压力繁重的条件下,提升自身身体素质,成为当前初
当前神经网络框架例如SSD、Yolo、R-FCN以及Faster R-CNN等模型的识别功能,大致可分成对物体的判别分类与识别定位两类。针对这两种物体识别的方法进行研究与应用开发,以鼠标
《1844年经济学哲学手稿》第一次把哲学、政治经济学和共产主义联结了起来,也第一次把自然、人、社会在同一层面上统一了起来。马克思的伟大之处就在于:他发现了犹如达尔文在
黄河调水调沙就是利用干支流水库群对进入下游的水沙关系进行调节和控制,塑造出相对协调的水沙关系,以充分发挥下游河道的输沙能力,遏制河槽萎缩、恢复并维持中水河槽.经多年
缺血性脑卒中是一种急性脑血管病,目前主要的治疗手段是及时进行溶栓或取栓治疗以实现血管再通,但这一过程会对脑血管造成严重的再灌注损伤,使血脑屏障的结构和功能受到破坏,
为了提高视频手势识别的准确率与鲁棒性,更好地利用不同深度神经网络的优势,文章提出一种集成多种卷积神经网络的手势识别方法。其利用基于SSD架构的深度卷积神经网络进行多
随着我国经济技术的快速发展,建筑工程管理在建筑行业中发挥的作用也越来越明显。建筑工程管理主要是针对工程中的工程进展、投资成本、工程质量进行管理,所以在建筑工程中占
质量问题是建筑工程中的头等大事,严把质量关是对人民生命财产负责的重要手段之一。想要确保建筑工程的质量问题就要做好对建筑工程管理工作的控制。再加上人们对建筑工程日
及时规范医疗机构对"中标"药品的零售价,减轻社会医疗费用负担,这是药品招标采购的目的之一.目前新闻媒介常宣传,通过药品招标采购"让利给患者"、"让利给群众"、"让利给老百
在日趋激烈的市场竞争中,企业日益重视物资供应工作,本文分析了企业物资供应管理存在的问题,提出了完善企业物资供应管理的改进措施。