酚酸化合物的荧光特性研究

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茶叶酚酸化合物是茶叶中重要的生化成分,也是各种中药材重要的活性成分。随着对酚酸化合物药理作用研究的深入,对其分析检测灵敏度要求越来越高,而荧光分析法则具有灵敏度高、选择性好并能提供比较多物理参数的特点,在分析方面的应用越来越广泛。本文拟系统研究pH、浓度、溶剂等环境因素对酚酸荧光光谱和荧光强度的影响,为酚酸化合物的分析检测及药理研究提供新的实验依据。研究结果如下:1.影响对-香豆酸、咖啡酸和绿原酸荧光图谱的因素为pH和溶剂种类,随溶液碱性的增强其荧光峰均发生了明显的红移;这三种酚酸与溶剂(水、甲醇、二甲基亚砜)之间有明显的氢键效应,导致其荧光图谱不同:与水溶剂相比,当以甲醇或二甲基亚砜为溶剂时,其Stoke位移值均明显变小。影响这三种酚酸荧光强度的因素主要是pH和浓度,若以水为溶剂,对-香豆酸(λex/λem=350/440 nm)溶液在pH10.0、浓度为0.061mol/L时的荧光强度最强;咖啡酸(λex/λem=385/465 nm)在pH8.5、浓度1.665mol/L时的荧光强度达到最大值;绿原酸(λex/λem=380/490 nm)在pH11.5、浓度0.254mol/L时的荧光强度最大。2.影响没食子酸荧光图谱的因素为pH和溶剂种类,以水为溶剂,当pH1.5~9.5时,最大激发峰λex和发射峰λem分别为261、345 nm;当pH 9.5~11.5时,其λex/λem=360/445 nm,激发峰和发射峰均发生了明显的红移;pH>11.5时,其激发峰和发射峰逐渐紫移;没食子酸与溶剂(水、甲醇、乙腈、二甲基亚砜)之间有明显的氢键效应,以甲醇为溶剂时,其λex/λem=273/366 nm,与水溶剂相比,其激发峰和发射峰均发生了明显的红移,但Stoke位移变化不显著;当以乙腈和二甲基亚砜为溶剂时,λex/λem分别为270/340 nm、290/340 nm,与水溶剂相比,其Stoke位移值明显变小,且发射峰紫移。影响没食子酸荧光强度的因素主要有pH和浓度,若以水为溶剂,当pH5.5、浓度0.082mol/L时其荧光强度达到最大值。3.影响鞣花酸荧光图谱的因素为pH、浓度和溶剂种类,在以甲醇或二甲基亚砜为溶剂,浓度为0.165mol/L,pH在1.0~8.5之间时,其最大激发峰λex和发射峰λem分别为340、410 nm;随碱性增强酚羟基和酯键解离,使其最大激发峰和发射峰均向长波长移动。浓度为0.017~0.165 mol/L时,激发图谱为双波长激发型,随浓度的增大,激发峰λex260 nm逐渐向长波长移动,而激发峰λex360 nm逐渐向短波长移动;当浓度达到0.165mol/L时,激发峰型变宽,其波长范围在290~380nm,其最大激发峰λex340 nm;而当浓度大于0.165mol/L时,激发峰均发生红移,其最大激发峰λex330 nm。影响鞣花酸荧光强度的因素主要有pH和浓度,若以甲醇或二甲基亚砜为溶剂,当pH1.5、浓度0.165mol/L时,鞣花酸(λex/λem=340/410 nm)荧光强度最强。
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