日本七鳃鳗(Lampetra japonica)口腔腺分泌液(lamphredin)纤溶酶活性及其组分的分离鉴定

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日本七鳃鳗(Lampetra japonica)是古老的圆口纲(Cyclostomata)头甲亚纲(Cephalaspidomorphi)的代表动物之一,主要分布于我国松花江流域,其口腔腺分泌液(lamphredin)具有抗凝的功能。非变性(PAGE)和变性凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明lamphredin含有两种含量较为丰富的蛋白质,本实验室将这两种蛋白质分别命名为BGSP-1(buccal gland secretion protein-1,140,000Da)和BGSP-2(buccal gland secretion protein-2,27,500Da)。BGSP-1和BGSP-2的N末端20个氨基酸分别是EAESF QNLKT RICGG LNGLG(BGSP-1)和TSVND WKLLD TKLSA NRKVI(BGSP-2)。通过凝胶过滤层析(Sephadex G-75)分离纯化出lamphredin中的BGSP-1、BGSP-2和低分子量多肽组分,但是只有BGSP-1具有纤维蛋白原溶解酶活性。Lamphredin或BGSP-1优先降解人纤维蛋白原的Aα链,其次以较慢的速度降解Bβ链,但是并不降解γ链。通过SDS-PAGE检测,BGSP-1和lamphredin降解纤维蛋白原所产生的片断相一致,其酶切部位同为Ala10-Glu11和His368-Ser369。BGSP-1水解人类神经tau蛋白的酶切位点是Glu12-Asp13和Gln244-Thr245。在相同的条件下,lamphredin无血清白蛋白和血红蛋白水解酶活性。在EDTA-2Na存在时,lamphredin或BGSP-1的纤维蛋白原溶解酶活性均被抑制。二价金属阳离子如Ca2+或Mg2+(Zn2+除外)能够恢复由EDTA-2Na
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