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本论文以青菜(Brassica rapa var chinensis)为实验对象,选用不同方法检测叶片衰老过程中各指标变化,从而找出能表现叶片衰老的先期指标,并对筛选出的指标进行叶片逆境忍受程度的实验。具体实验结果如下: (1)通过使用不同的光谱方法检测青菜叶片衰老过程的各项指标。使用叶绿素荧光测定仪检测青菜衰老过程中的荧光参数,发现0-1d青菜的非光学猝灭系数qN和NPQ有显著变化,可作为无损检测青菜衰老的早期指标。其次是紫外分光光度计积分球无损检测青菜,可以发现次早期的1-2d青菜的显著差异。近红外光谱无损检测青菜叶绿素含量的方法是可行的,可以代替传统测定方法大批量无损快速检测青菜叶绿素。 (2)青菜热乙醇的提取液使用荧光分光光度计测定。在激发波长434nm,发射波长673 nm检测荧光强度,是0-1d的青菜早期衰老检测最佳指标;其次激发波长255 nm,发射波长347nm检测荧光强度,也可以检测0-1d的青菜显著变化。激发波长255nm,发射波长512nm检测荧光强度,可以作为1-2 d的青菜次早期衰老检测指标。 (3)分别选用钾、钙、钠、氯离子和氨电极检测青菜叶片衰老过程中每天的离子渗漏情况,发现氯、钾离子溶出总量大,并且主要是细胞膜内溶出;钠、钙、铵离子次之。钠、钙离子和氨早期有大量溶出,说明其在细胞间隙大量存在。钙离子在细胞外以结合态存在,钙离子胞外溶出变化大,说明细胞壁成分有早期变化。叶片衰老时,各种离子溶出显著增加。钙离子电极在0-1d的青菜上升的灵敏度最高,最适合早期测定青菜衰老。铵离子在1-2 d,以及其后溶出最显著。青菜衰老中细胞内溶出的金属离子以钾电极测定最为显著。 (4)通过静态顶空-气质联用、未酯化和酯化的气质联用测定青菜叶片挥发性物质,发现静态顶空-气质联用和未酯化的气质联用法检测出的青菜叶片挥发性成分不足10种,而样品酯化后测出了多达50种挥发性成分,说明样品需要酯化后才能准确测出质膜成分。0-1d青菜的亚麻酸、亚油酸、棕榈酸、7,10,13-十六碳三烯酸、油酸-β--烯-豆甾醇酯和叶绿醇,出现了显著性的变化,可以作为青菜衰老早期指标。1-2 d青菜的乙酸-β-谷甾醇、棕榈油酸也出现显著变化,可以作为次早期检测指标。但气质检测的缺点是样品需要破坏、提取、酯化,还需要高档仪器。 (5)通过高效液相色谱法测定青菜衰老过程中游离氨基酸的变化,发现赖氨酸0-1d大量上升,上升了1.76倍,1-2d出现高峰,后下降。门冬氨酸和脯氨酸反而随着青菜衰老出现下降,其放置1d就有很大的下降。但青菜脯氨酸含量很少,容易漏检。因此,门冬氨酸和赖氨酸可能适合作为青菜衰老的早期指标。 (6)通过以上三种方法选出叶绿素荧光测定仪和钾离子溶出作为最容易检测的指标,对青菜短期逆境忍受能力进行实验,发现青菜失水20%以下基本正常,很耐失水,且高温和低温极限分别为46℃和1℃。10%乙醇处理,青菜叶片正常,20%乙醇已经有不良影响。0.1%乙酸处理,青菜的qN和NPQ显著上升,启动光合作用抗逆境机制。0.6%以上乙酸处理青菜的叶绿素荧光参数异常,青菜受到伤害。