甲壳素对生姜腐烂病的预防与作用机制研究

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生姜(Zingiber officinale Roscoe)是多年生草本植物。由于生姜无性繁殖过程中易累积致病菌,在其种植和采后过程中极易发生病害。传统的化学防治方式,不仅带来环境污染、还存在食品安全问题。甲壳素作为天然活性物质,可降低生姜采后病害发病率。生姜在病变过程中,体内的微生物群落起着重要作用,对寄主微生物群落的分析可揭示微生物群落在植物病变中的作用机制。研究甲壳素预防生姜病变及对生姜块茎中微生物群落结构变化,可为采后生姜腐烂的绿色防控提供理论依据。本研究以四川、重庆栽培品种竹根姜为研究材料。分别使用尖孢镰刀菌(Fusarium Oxysporum)与甲壳素进行侵染实验与防效试验。采用高通量测序技术分析处理样品中微生物群落结构的差异,为鲜食生姜腐烂病的生物防治提供一定的理论依据。试验结果如下:1.尖孢镰刀菌对鲜食生姜的致病性研究。首先,制备浓度为10~7CFU/m L、10~8CFU/m L、10~9CFU/m L、1010CFU/m L的F.Oxysporum孢子悬浮液,对鲜食生姜进行侵染。3 d后发病率对照(CK)约为12.66%、10~7CFU/m L为66%、10~8CFU/m L为66.67%、10~9CFU/m L为73.33%、1010CFU/m L为90%;12 d后对照组(CK)发病率约为55.5%,各浓度侵染12 d后发病率都为100%。实验结果表明以上孢子浓度对生姜均有致病性,且浓度越大致病性越强。2.制备1μg/m L、25μg/m L、50μg/m L、75μg/m L、100μg/m L五个不同浓度的甲壳素溶液对尖孢镰刀菌进行平板抑制实验。采用十字交叉法计算菌饼直径,100μg/m L甲壳素对尖孢镰刀菌的抑制效果显著,EC50值为0.003μg/m L。3.将鲜食生姜浸泡于浓度为100μg/m L的甲壳素溶液中,20 min。甲壳素(CH)浸泡鲜食生姜12 d的发病率为5%、病情指数为13:对照组(CK)组12 d的发病约为55.5%、病情指数约为39.17;孢子侵染组(IF)12 d的发病约64.235%、病情指数约86.98。以上结果表明,甲壳素能显著抑制生姜腐烂,其相对防效为92.3%。4.通过高通量测序技术对各处理组样品进行微生物群落分析。结果表明,各处理组之间微生物群落丰度、结构存在显著差异;甲壳素处理组(CH)中微生物群落丰度最低,孢子处理组(IF)中微生物群落丰度最高。甲壳素(CH)样本中,篮状菌属(Talaromyces)、丝孢囊果属(Eurotiaies)、青霉属(Penicillium)、曲霉属(Aspergillus)为优势菌群,与其他样本中的优势菌群有显著差异。对照组(CK)样本中,酵母菌属(Cutaneotrichosporon)、(Apiotrichum)节担菌属(Wallemia)、季也蒙迈耶氏酵母属(meyerozyma)、木霉属(Trichoderma)、镰刀菌属(Fusarium)为优势菌群。孢子(IF)处理组的优势菌群是顶孢霉属(Acremonium、束梗孢属(Stilbella)、Pyrenochaetopsis。甲壳素孢子(CHIF)处理组的优势菌群是德巴利酵母属(Debaryomyces)、库茨马尼埃拉属(Kurtzmaniella)、癣囊腔菌属(Plectosphaerella)、帚枝霉属(Sarocladium)。以上结果表明甲壳素能有效通过抑制生姜表面微生物的繁殖抑制生姜腐烂。
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