Ad-hBMP-2基因转染骨骼肌卫星细胞体外成骨分化的实验研究

来源 :山东大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuan461618
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的: 1.探讨骨骼肌卫星细胞体外分离培养、鉴定的方法,研究骨骼肌卫星细胞的生物学特性,为后续的实验奠定基础。 2.评价腺病毒介导的人骨形态发生蛋白2(Ad-hBMP-2)基因体外转染骨骼肌卫星细胞后,肌卫星细胞分化为成骨样细胞的能力;并测定基因转染后目的基因体外表达的情况。应用Ad-GFP基因转染肌卫星细胞,测定腺病毒转染的效率。为应用骨骼肌卫星细胞修复骨缺损提供实验依据。 方法: 1.采用Ⅰ型胶原酶和胰蛋白酶二步消化法获取大鼠骨骼肌卫星细胞,进行体外原代和传代培养。观察细胞的形态,通过生长曲线、细胞融合率等指标研究骨骼肌卫星细胞的增殖与分化能力,利用免疫细胞化学染色对所获得的细胞进行鉴定。 2.Ad-hBMP-2基因体外转染骨骼肌卫星细胞后,通过形态学观察、生长曲线的测定、碱性磷酸酶(ALP)细胞化学染色及活性检测、骨钙素(OC)及Ⅰ型胶原的免疫细胞化学染色、矿化结节形成实验和Western—blot,观察Ad-hBMP-2基因转染后骨骼肌卫星细胞生物学行为的变化和目的基因表达的情况。Ad-GFP基因转染骨骼肌卫星细胞后2天,用荧光显微镜测定腺病毒转染效率,并观测Ad-GFP基因转染的骨骼肌卫星细胞传代后绿色荧光蛋白的表达情况。
其他文献
国务院机关事务管理局今天召开机关党的第十三次代表大会 ,总结四年来的工作 ,部署今后一个时期机关党的工作任务 ,对于进一步加强国管局机关党的建设、推动全局和省区市政府
物理学是自然科学中最具活力、最富创新的学科,是人们不断追求和探索新的科学知识的重要工具。本文论大学物理在高等教育中的基础性地位。
药理学是沟通基础医学与临床医学的桥梁学科,其内容枯燥繁杂、药物繁多、复杂抽象,容易混淆,是一门重要而难学难记的课程。笔者在高职护理专业的药理学教学实践中,尝试运用了案例
目前高职公共英语课程作为高职学校各类专业的公共基础课,其教学理念和教学模式由于没有鲜明地体现“职业化”,而导致跟不上高职教育的改革步伐。本文就高职公共英语存在的问题
目前,齿科金属和合金材料已广泛的应用于口腔修复等临床治疗中,其介入口腔环境后与口腔粘膜、牙龈组织、大量微生物直接接触会发生金属腐蚀导致金属离子及其衍生物析出,另外
项目教学法是指通过师生共同实施一个完整的项目而进行的教学活动。在《电子技术》课程中运用项目教学法,能够把理论和实践教学有机结合起来,充分发挥学生的创造潜能,提高学生解
人文社会科学是体系庞大的科学门类,它在工程教育中具有十分重要的地位和作用。联合国教科文组织曾为此作出如下的定义:“人文学是为工程师描述历代积累下来的人类经验在心灵上
根据教育社会学的角色理论、结构理论及教育经济学成本理论,对校企合作模式下多主体进行初步分析,进而探讨使多主体矛盾减弱乃至化解的机制,力图找到校企合作得以规模化、规范化
社区教育是向全社区开放,鼓励全社区参与,以实现“教育社会化,社会教育化为理念的教育。社区教育是个庞大的社会工程,应建立强有力的管理体制和灵活有效的运行机制来推进和保障这
牙髓血管再生/牙髓血运重建是治疗牙髓坏死的年轻恒牙的新方法,可达到促使牙根继续发育的临床效果,较传统的根管治疗具有明显的优越性。血小板浓缩生长因子(concentrate growth