【摘 要】
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红色嗜盐古菌Halorubrum细胞膜富含类胡萝卜素,菌红素（Bacterioruberin）是古菌类胡萝卜素的主要成分。作为一类长链类胡萝卜素,菌红素分子包含13个共轭双键且末端含有羟基,是一种有效的自由基清除剂。本研究将古菌Halorubrum及其类胡萝卜素添加于饲料中,研究古菌及其类胡萝卜素对凡纳滨对虾生长和抗胁迫能力的影响。通过发酵获得古菌Halorubrum IT-4菌体,用蒸馏水裂解古
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红色嗜盐古菌Halorubrum细胞膜富含类胡萝卜素,菌红素（Bacterioruberin）是古菌类胡萝卜素的主要成分。作为一类长链类胡萝卜素,菌红素分子包含13个共轭双键且末端含有羟基,是一种有效的自由基清除剂。本研究将古菌Halorubrum及其类胡萝卜素添加于饲料中,研究古菌及其类胡萝卜素对凡纳滨对虾生长和抗胁迫能力的影响。通过发酵获得古菌Halorubrum IT-4菌体,用蒸馏水裂解古菌细胞,用三氯甲烷和甲醇提取菌体色素,将菌体和色素分别拌合饲料直接投喂对虾。将凡纳滨对虾1200尾随机分为5个组,每组4个平行,每个平行60尾虾。实验分组为饲料对照组（FEED）、低浓度色素组（50CPE）、高浓度色素组（200CPE）、低浓度菌体组（5HRM组）、高浓度菌体组（20HRM组）。养殖条件为:20 g/L稀释卤水、28℃、p H7.0±0.5。养殖8周后,测定对虾生长和存活;对对虾进行氨氮胁迫和副溶血弧菌攻毒后,测定其存活、肝胰腺抗氧化酶活性以及抗氧化酶和免疫酶基因的表达,通过肝胰腺组织切片观察Halorubrum菌体和古菌类胡萝卜素的添加对对虾肝胰腺的影响。结果表明,20HRM组对虾存活率最高（58.64%）,显著高于其它组别（P＜0.05）;20HRM组对虾的增重率和特定生长率显著高于色素组（P＜0.05）。与FEED组相比,投喂菌体组和色素组的对虾肝胰腺结构相似,表明其对对虾肝胰腺没有损伤。将对虾置于氯化铵浓度为125 mg/L的水体中84 h后,200CPE组对虾存活率最高（85.7%）,显著高于其它组别（P＜0.05）;各组对虾肝胰腺在氨氮胁迫后T-SOD活力呈现下降趋势,5HRM组GSH-Px活力降低;对虾肝胰腺20HRM组T-SOD、CAT基因表达量显著高于其他组,5HRM组GST、GSH-Px基因表达量显著高于其他组,20HRM和5HRM Crustin基因表达量显著高于其他组,200CPE组CAT基因表达水平显著高于其他组（P＜0.05）。将对虾置于副溶血弧菌（Vibrio parahemolyticus）浓度为1.5×10~8 CFU/m L水体中120 h,5HRM组存活率最高（88.89%）,显著高于FEED组（P＜0.05）;弧菌攻毒后,5HRM组对虾肝胰腺T-SOD、CAT基因表达量显著高于20HRM组,200CPE组T-SOD、CAT基因表达显著高于FEED组,50CPE组GSH-Px、GST基因表达显著高于其他组,20HRM组Hsp70和Crustin基因表达显著高于其他组（P＜0.05）。综上,古菌Halorubrum的添加提高了凡纳滨对虾的存活和生长性能,Halorubrum及其类胡萝卜素作为饲料添加剂可以提高凡纳滨对虾对氨氮的抗氧化和对弧菌的抗病能力,增强对虾的抗胁迫能力。本论文研究结果为古菌新型饲料添加剂的开发,促进水产动物营养和病害防控提供了新思路。
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