【摘 要】
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该研究采用mRNA差异显示技术筛选肝癌及非癌肝组织的差异表达基因,并构建和筛选人肝癌组织cDNA文库,以克隆肝癌相关基因,提取手术切除肝癌及非癌肝组织成对标本的总RNA,逆转
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该研究采用mRNA差异显示技术筛选肝癌及非癌肝组织的差异表达基因,并构建和筛选人肝癌组织cDNA文库,以克隆肝癌相关基因,提取手术切除肝癌及非癌肝组织成对标本的总RNA,逆转录获得cDNA片段,以mRNA差异显示技术筛选差异表达基因.所获得的差异表达基因片段行PCR扩增,并对PCR产物进行PAGE纯化和TA克隆.随机挑选含有目的基因片段的单克隆,进一步培养细菌,提取质粒DNA.对这些基因片段进行序列分析,并通过GenBank/BLAST数据库进行序列的同源性比较,对有意义片段以Northern印迹杂交方法予以来源确认.采用Poly(A)QuickIsolationKit分离组织mRNA,并利用ZAP-cDNAGigapackⅢGoldCloningKit进行双链cDNA的合成及重组体的包装,进而获得肝癌组织cDNA扩增文库并进行筛选.该研究发现,APOH在一些肝癌组织中有高表达,可能是一种肝癌相关基因.截至目前,尚未见文献中有相关报道,进一步研究正在进行中.另外,研究人员还获得了一个可能的肝癌相关未知基因片段,为进一步研究创造了条件.
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