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目的:脑胶质瘤在中枢神经系统最多见,属原发性肿瘤,约占成人脑内肿瘤的45%-60%。恶性神经胶质瘤呈浸润性生长,易导致肿瘤细胞增殖、复发、迁移,使其难以完全治愈。治疗方法为手术切除,辅以术后放、化疗等。随着现代医学的进步,技术的发展,越来越多的手段被逐渐应用于胶质瘤的治疗中。药物治疗胶质瘤的相关机制尚不完全明了。胶质瘤在中医学属于脑瘤范围,我国古代文献中对“脑肿瘤”无明确病名记载,但在真头痛、癫痫、中风、眩晕、呕吐、厥逆等疾病中有一些类似症状的记述。依据传统医学观:整体观念和辩证论治,虽无“脑肿瘤”病名,但仍可采用“扶正祛邪”、“调整阴阳”的治疗原则。而蟾蜍灵的抗肿瘤作用是近几年的研究热点。本研究通过将蟾酥中提取的有效成分蟾蜍灵,分组处理脑胶质瘤细胞U87、U251,在时间、浓度各异的情况下,采用不同实验方法检测蟾蜍灵对脑胶质瘤细胞的影响,探索蟾蜍灵治疗脑胶质瘤的机制,为以后的研究者提供参考和思路。材料与方法:将购于中国科学院细胞库的人脑胶质瘤细胞株U87、U251进行体外培养,依据既往文献记录,配置浓度适宜的蟾毒灵,分别取6个浓度梯度,作用于两种胶质瘤细胞,分别培养24、48、72h,采用CCK-8法检测蟾蜍灵对胶质瘤细胞增殖抑制率,求出IC50。依据IC50计算出蟾蜍灵的适宜给药浓度。克隆形成实验检测胶质瘤细胞的增殖抑制,Western-blot测定人端粒酶逆转录酶（hTERT）的蛋白表达,real time PCR检测hTERT基因表达水平,CCK-8法检测蟾蜍灵对人原代胶质瘤细胞的杀伤作用,为临床采用蟾蜍灵治疗胶质瘤提供理论依据。结果:1.蟾蜍灵浓度在560nmol/L时,对U251细胞都有一定的抑制作用;蟾蜍灵浓度在20160nmol/L时,抑制U87细胞的增殖,且呈时间和剂量依赖性,蟾蜍灵浓度越高,作用时间越长,对两种胶质瘤细胞的抑制作用越明显。2.克隆形成实验结果显示,蟾蜍灵能够有效地抑制U251及U87细胞的克隆形成,呈时间和剂量依赖性。3.Western-blot结果显示,与对照组（不加蟾蜍灵组）相比,蟾蜍灵组明显抑制胶质瘤细胞hTERT蛋白表达,且随药物浓度增加而蛋白表达水平降低。4.实时荧光定量PCR结果显示,与对照组（不加蟾蜍灵组）相比,蟾蜍灵组U87、U251细胞hTERT-mRNA的表达降低明显。5.体外实验证明,蟾蜍灵对人原代胶质瘤细胞具有明显的杀伤作用。结论:1蟾蜍灵对体外培养的人脑胶质瘤细胞U87、U251以及人原代胶质瘤细胞都具有抑制增殖的作用,且呈时间和剂量依赖性。2蟾蜍灵对人hTERT的表达产生明显的影响,抑制hTERT的表达,进而降低端粒酶的活性,促进胶质瘤细胞的死亡。