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血红蛋白是红细胞中具有载氧功能的蛋白。聚合血红蛋白(PolyHb)是由血红蛋白用多官能团交联剂聚合而得的。PolyHb是经过病毒灭活的,因而可避免常规临床输血相关的疾病传播和异型输血反应。此外,聚合血红蛋白以过期或废弃的血液为原料,减少血源浪费、缓解血液紧张。因此,PolyHb成为一类重要的红细胞代用品。稳定性是聚合血红蛋白作为红细胞代用品的一个重要指标,因此本论文着重研究了聚合血红蛋白稳定性。同时制备了各项指标合格的纯化血红蛋白,建立了以血红蛋白为基础的红细胞代用品P50的测定方法。
对人脐带血纯化血红蛋白及其聚合血红蛋白用改进后的氧合曲线测定方法进行研究。结果表明:氧合曲线呈S形,纯化血红蛋白样品的P50为(7.17±0.07)mmHg,5-磷酸吡哆醛(PLP)修饰的聚合血红蛋白的P50为(20.50±0.25)mmHg。
以pH、血红蛋白与硼氢化钠的摩尔比、聚合时间对戊二醛聚合血红蛋白稳定性进行三因素三水平正交试验。结果表明:各组分子量分布在前两个月都有一定变化,到第三个月时分子量分布都趋于一致。其中pH为9.3、聚合时间为2h、血红蛋白与硼氢化钠的摩尔比为1∶15的实验组分子量分布变化为最稳定。