浮游植物的爆发性增殖常会引起赤潮事件,造成严重的生态破坏和经济损失,因此监测浮游植物的动态变化具有重要意义.传统的检测方法耗时耗力,操作不便而且效率低下.为了能够及时地监控浮游植物细胞数量的动态变化,预测或预防赤潮的发生,该文利用抗体技术发展了一种快速、简便、有效的检测新手段,即竞争型酶联免疫法.该文第一章主要探讨竞争型酶联免疫法应用于浮游植物检测的可行性.首先通过免疫小鼠制备了抗旋链角毛藻和柔弱角毛藻的抗血清;然后分别建立了旋链角毛藻和柔弱角毛藻的竞争型酶联免疫检测方法,其定量检测范围分别为146-350,000个细胞和521-1,250,000个细胞;检测极限分别为120和500个藻细胞.经比较,应用竞争型酶联免疫法可以获得与传统的显微计数法一样的定量结果.该文第二章主要探讨几种多克隆抗体制备方法的优缺点.分别通过免疫小鼠、家兔和产蛋鸡制备了旋链角毛藻的鼠抗血清、兔抗血清和蛋黄抗体;分析了这些抗体的效价水平变化、特异性和总产量等指标后,发现兔抗血清制备的时间短,效价高,而且可获得较多的抗体,因此在浮游植物的多克隆抗体制备过程中,采用家兔作为接受免疫的对象优点较多.不同的免疫程序对抗体的产生影响不大.该文第三章详细地探讨了5种浮游植物竞争型酶联免疫检测法的建立及应用情况.通过免疫家兔分别制备了裸甲藻、米氏裸甲藻、塔玛亚力山大藻、膜质舟形藻和诺氏海链藻的抗血清.应用这些抗血清,分别建立了上述5种浮游藻的竞争型酶联免疫检测方法,其定量检测的线性范围分别为:24-6,250,000、19-625,000、19-625,000、1280-312500和19-625,000个细胞;检测极限分别为12、13、11、963和12个藻细胞.这些检测方法的精密度、准确度以及准确性都较高.该章的结果进一步说明了竞争型酶联免疫法可以适用于浮游植物的快速、高效、准确的定量检测.该文第四章主要探讨中肋骨条藻的定量检测.分别制备了中肋骨条藻的兔抗血清和蛋黄抗体,通过抗体封闭,利用改良的抗血清和蛋黄抗体,建立了中肋骨条藻的竞争型酶联免疫法和双抗夹心酶联免疫法,其检测范围分别为320-5,000,000个细胞和50-36,450个细胞;检测极限分别为277和21个细胞.利用竞争型酶联免疫法,分析了胶州湾水域中肋骨条藻的季节变化特征.关键词:浮游植物抗体竞争ELISA双抗夹心ELISA摘要通过免疫小鼠制备了抗旋链角毛藻和柔弱角毛藻的多克隆抗血清.它们仅特异性地识别三种角毛藻属海藻,而与其它属海藻几乎没有交叉反应.应用这两种抗血清分别建立了旋链和柔弱角毛藻的竞争型酶联免疫检测方法,其定量检测范围分别为146-350,000个细胞和521-1,250,000个细胞;检测极限分别为120和500个藻细胞.应用所建立的竞争型酶联免疫检测法对海藻样品进行了定量检测,测定结果与藻细胞显微计数的结果比较,发现二者基本吻合.