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研究背景近年来靶向治疗成为NSCLC治疗的重要手段,但是用药一段时间后都不可避免的产生继发性耐药。目前对NSCLC靶向治疗继发性耐药后的治疗尚无统一定论,改行化疗仍是其有效的治疗方法之一。如何选择对靶向治疗耐药NSCLC敏感的化疗药物具有重要的临床意义,值得深入研究。本实验检测肺腺癌细胞株PC-9及PC-9/GR,对顺铂、吉西他滨、长春瑞滨、紫杉醇、多西紫杉醇、培美曲塞的敏感性,以及两个细胞株ERCC1、RRM1、TUBB3、TS基因mRNA及蛋白的表达情况。为临床EGFR-T790M突变导致EGFR-TKI继发性耐药患者后续化疗药物的选择提供临床前依据。材料和方法1、将PC9细胞培养于含有10%胎牛血清的1640完全培养基,PC9/GR细胞培养于含浓度为10mmol/L的吉非替尼及10%胎牛血清的1640完全培养基,并置于37℃、5%CO2、湿度为80%的培养箱中培养。2、应用MTT法检测PC9及PC9/GR细胞对顺铂、吉西他滨、长春瑞滨、紫杉醇、多西紫杉醇、培美曲塞的IC50。3、分别利用液相芯片法和Western-Blot法,检测PC9及PC9/GR细胞ERCC1、RRM1、TUBB3、TS基因mRNA及蛋白的表达水平。4、采用SPSS19.0统计软件包对数据进行分析,以P<0.05为有统计学意义。结果1、MTT方法检测结果,与PC9细胞比较,PC9/GR细胞对顺铂、吉西他滨、培美曲塞的IC50值明显增高(P<0.05),对长春瑞滨、紫杉醇、多西紫杉醇IC50值明显降低(P<0.05)。2、液相芯片方法检测PC9/GR细胞较PC9细胞ERCC1、TS、 RRM1mRNA的表达量明显升高(P<0.05),TUBB3mRNA的表达量明显降低(P<0.05)。3、Western-Blot方法检测PC9/GR细胞较PC9细胞ERCC1、 TUBB3、TS、RRM1蛋白的表达量明显升高(P<0.05),TUBB3蛋白的表达量明显降低(P<0.05)。结论1、肺腺癌细胞株发生EGFR-T790M突变后对化疗药物敏感性发生变化,对顺铂、吉西他滨、培美曲塞的敏感性降低,对长春瑞滨、紫杉醇、多西紫杉醇的敏感性增高。2、肺腺癌细胞株发生EGFR-T790M突变后ERCC1、RRM1、TS mRNA及蛋白表达量明显升高,TUBB3mRNA及蛋白表达量明显降低,可能是其化疗药物敏感性发生变化的原因之一。本论文共计图3幅,表3个,参考文献49篇。