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背景:大量流行病学研究表明肥胖与各种癌症的发生和发展关系密切,肥胖通常会导致肝脏疾病,如非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)和更严重的非酒精性脂肪型肝炎(NASH),进而导致肝脏发生脂肪性炎症,亦可导致肝纤维化,从而诱发肝硬化,而后者是公认的发生肝癌的高危因素之一。有研究报道在肥胖小鼠动物模型中,无论是饮食或遗传性肥胖都是强烈的诱导肝癌发生的因素,大量的研究表明肥胖可能通过诱导促癌细胞因子IL-6和TNF的产生进而促进肝脏炎症,并通过激活致癌基因转录因子STAT等途径促进肝癌发生和发展。microRNA(miRNA)是近年来新发现的一类非编码单链小分子RNA,在转录后水平调控多基因的表达,是基因调控网络中的关键成分,参与调节细胞代谢、增殖、凋亡、分化和发育,其表达异常会导致肿瘤等重大疾病。多项研究证据表明miRNA在肝癌的进展中发挥着重要作用,并且直接参与肝癌的分化、凋亡、侵袭和远处转移的过程。基于此,本论文立足于miR-27a,早先对其的研究发现miR-27a在脂肪细胞的分化中起关键作用,而最近研究表明miR-27a在乳腺癌、肺癌、胰腺癌等多种恶性肿瘤的发生和发展中扮演着癌基因的角色,但是miR-27a在肥胖诱导的肝癌中的作用和机制尚不清楚。本文重点研究miR-27a对肥胖人群肝癌发生发展的作用,并探讨其促进肝癌细胞增殖的分子机制,为肥胖肝癌的诊断和治疗提供新靶点。目的:探讨脂肪组织分泌的miR-27a在促进原发性肝癌发生和介导肥胖相关恶性肿瘤发生的机制,并为肿瘤的生长并干预肿瘤的形成和进展提供新的思路。方法:首先应用Real-time PCR法检测肥胖原发性肝癌和非肥胖原发性肝癌,健康人群对照组血清中miR-27a的表达水平,和肥胖原发性肝癌,非肥胖原发性肝癌患者肝癌组织,癌旁肝组织,以及大网膜组织中miR-27a的表达水平。采用免疫组织化学染色方法测定临床组织样本中FOXO1,P21,P27,CyclinD1的表达情况。通过构建过表达miR-27a的3T3-L1脂肪细胞,并与肝癌细胞株HepG2分组共培养,随后检测各组肝癌细胞增殖活性和细胞周期,并通过RT-PCR法和western blot法测定FOXO1,P21,P27,CyclinD1的mRNA和蛋白表达情况。结果:所有原发性肝癌患者的肿瘤组织miR-27a水平较癌旁组织明显升高;肥胖肝癌患者的肿瘤组织miR-27a表达水平是非肥胖肝癌患者2倍,这表明miR-27a上调可能可以作为肥胖相关肝癌的生物学诊断标记物;相比非肥胖肝癌患者和健康人群,肥胖肝癌患者血清miR-27a水平明显升高;肥胖肝癌患者体内大网膜脂肪组织中的miR-27a水平,约为非肥胖肝癌患者和健康人群5倍。miR-27a高表达的肝癌组织中FOXO1,P21和P27表达水平显著降低,CyclinD1表达水平显著升高。而miR-27a低表达的癌旁组织中FOXO1,P21和P27表达水平显著升高,而Cyclin D1的表达水平显著降低。3T3-L1脂肪细胞可通过旁分泌miR-27a的降低肝癌细胞FOXO1,P21,P27的mRNA和蛋白表达,并增加Cyclin D1的mRNA和蛋白表达,从而促进细胞周期G1/S转换,诱导肝癌细胞HepG2增殖。结论:脂肪组织分泌的miR-27a通过下调转录因子FOXO1,降低细胞周期抑制蛋白P21和P27的表达,增加细胞周期调节蛋白CyclinD1表达,从而促进G1/S期的细胞周期转换,最终促进肝癌细胞的增殖。