【摘 要】
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香蕉是福建重要的亚热带特色水果,栽培历史悠久,有着很高的经济价值。但由于香蕉为无性繁殖,而且又是多倍体,其遗传背景复杂,生产上常出现同物异名和同名异物现象,品种类型分类混乱
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香蕉是福建重要的亚热带特色水果,栽培历史悠久,有着很高的经济价值。但由于香蕉为无性繁殖,而且又是多倍体,其遗传背景复杂,生产上常出现同物异名和同名异物现象,品种类型分类混乱,这些都造成了其种质资源保存利利州的困难。本研究利用RAPD分子标记技术对以福建香蕉遗传资源为主的54份材料进行遗传多样性分析。主要研究结果如下:1.利用改良的CTAB方法从香蕉叶片中提取高质量的DNA。2.香蕉RAPD-PCR反应体系的优化。在参考一般RAPD分析反应程序的基础上,经过反复试验,确定适合香蕉PCR扩增程序为:94℃预变性5min;94℃变性1min;38℃退火1min;72℃延伸2min;变性(?)延伸,循环45次;最后72℃延伸2min。PCR扩增的体系(总体积25μL)为:模板DNA 20ng,dNTP 200μmol/L,10×PCR Buffer2.5μL,引物0.20μmol/L,Taq酶0.75U,ddH2O17.85μL。3.香蕉种质资源的RAPD分析。利用16条随机引物,对香蕉54份遗传资源进行PCR扩增,每条引物均能够产生清晰的条带,共扩增出194条DNA带,其中191条皆为多态性条带,多态性比例为98.45%,如此高的多态性表明香蕉品种间具有丰富的遗传多样性。借助SPSS13.0软件分析RAPD表型数据矩阵,计算各样品间的相似系数,建立亲缘关系聚类树状图。依据此图,以遗传距离GD=0.70为界,将供试香蕉品种分成三大类群:第一类群包括了36份材料,主要为香牙蕉类:第二类群包括了11份材料,以粉蕉和龙牙蕉为主;第三类群包括了7份材料,以大蕉为主。4.利用16条RAPD引物扩增产生的4个特殊标记的存在或缺失,可以鉴定广东湛江巨龙蕉、南丰芭蕉和野生角蕉3份资源。5.筛选出21个香蕉材料可作为核心种质保存,这些材料扩增出来的条带可以代表香蕉种质资源的遗传多样性水平,涵盖了香牙蕉、粉蕉和大蕉这三大类型;除了常见的AAA、AAB和ABB三种基因型外,也包含了AA基因型(海南西贡蕉);在包含常见栽培种的同时,也包含了漳蕉8号、汕头红蕉和海南巴西蕉等新品种和珍贵品种。
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