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目的:建立大鼠肝移植急性排斥模型,观察外周血清TGF-β1、IFN-γ分泌水平和移植肝组织内Arg-1、iNOS蛋白的表达的变化,探讨供肝NK细胞减轻肝移植术后急性排斥反应的机制。方法:以Lewis大鼠为肝移植供体、BN大鼠为受体,采用改良“二袖套”法建立大鼠肝移植模型,并应用Co60射线照射清除供体免疫细胞以及经门静脉回输供肝NK细胞等技术,实验设立3个大组:A.急性排斥组(Lewis-BN);B.单纯Co60照射排斥组(Lewis-BN+供体Co60照射);C. Co60照射+供肝NK门静脉回输排斥组(Lewis-BN+供体Co60照射+受体门静脉输注供肝NK细胞)。分别于术后第1、3、7天收集外周血清用ELISA法检测TGF-β1和IFN-γ分泌水平,同时切取移植肝行病理学检查,Western Blot法检测移植肝Arg-1蛋白和iNOS蛋白的表达。另外设亚组观察移植后自然生存时间。结果:3组间术后急性排斥反应程度和平均生存时间比较有统计学意义:移植术后第7天B组移植肝组织急性排斥反应程度较A组明显加重(RAI:8.50±0.22vs.6.0±0.36, P<0.05),平均生存时间B组也较A组明显缩短(13.75±1.532dvs.45±3.396d,P<0.05)。但是,移植术后第7天C组移植肝组织急性排斥反应程度较B组明显减轻(RAI:7.33±0.21vs.8.50±0.22, P<0.05),平均生存时间C组也较B组明显延长(26±5.092d vs.13.75±1.532d,P<0.05)。实验结果提示供肝NK细胞经门静脉回输能减轻肝移植术后排斥反应,延长受鼠生存时间。ELISA结果显示,术后第7天外周血清TGF-β1分泌水平B组明显低于A组和C组(11.0±0.57vs.28.0±6.08ng/ml,11.0±0.57vs.27.6±1.45ng/ml,P<0.01),但外周血清IFN-γ分泌水平B组明显高于A组和C组(383.21±9.82vs.112.76±4.24pg/ml,383.21±9.82vs.213.52±5.78pg/ml,P<0.01)。实验结果提示,供肝NK细胞门静脉输注能引起移植受鼠外周血TGF-β1分泌水平升高和IFN-γ分泌水平降低,从而影响肝移植免疫反应。术后第7天移植肝组织中Arg-1蛋白表达B组明显低于A组(Arg-1/actine:0.687±0.04vs.0.487±0.03, P<0.05),但移植肝组织iNOS蛋白表达B组明显高于A组(iNOS/actine:0.05±0.01vs.0.23±0.03, P<0.05);同时,术后第7天移植肝组织Arg-1蛋白表达C组高于B组(Arg-1/actine:0.487±0.03vs.0.605±0.08,P<0.05),移植肝组织iNOS蛋白表达C组低于B组(iNOS/actine:0.23±0.03vs.0.09±0.02,P<0.05);实验结果提示,供肝NK细胞门静脉输注可能通过调节移植肝组织中Arg-1蛋白和iNOS蛋白的表达水平,影响肝移植免疫反应的进程。结论:1.供肝NK细胞减轻肝移植术后急性排斥反应的过程中,可以引起外周血细胞因子由Th1向Th2类偏移,即外周血IFN-γ和TGF-β1的表达水平可作为急性排斥反应的监测指标;2.供肝NK细胞对移植受体T细胞免疫功能的调节,可能与Arg-1蛋白的表达上调和iNOS蛋白的表达下调,进而影响精氨酸的代谢过程有关。