【摘 要】
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目的:检测NHE的调控因子CHP1和CHP2的mRNA在不同胚胎发育阶段的不同组织中的相对表达量,以研究它们在发育过程中的表达规律;同时在肿瘤组织中检测CHP1和CHP2的蛋白表达,以研究其
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目的:检测NHE的调控因子CHP1和CHP2的mRNA在不同胚胎发育阶段的不同组织中的相对表达量,以研究它们在发育过程中的表达规律;同时在肿瘤组织中检测CHP1和CHP2的蛋白表达,以研究其蛋白表达特征。
方法:从昆明鼠母鼠(孕10日、15日、20日)及其胚胎的肝、脑、肠、心、皮、脾、肾、肺、肌等组织中提取mRNA,以β-actin基因作为内对照,通过半定量RT-PCR检测目标基因表达情况;从人的多种肿瘤组织(白血病细胞、肺癌组织、胃癌组织、结肠癌组织、肝癌组织、宫颈癌组织)和对照的正常人的肝脏组织中提取蛋白,并通过免疫印迹技术检测目标蛋白的表达。
结果:CHP1 mRNA在胚胎发育的这三个阶段的所有组织中都有表达,并随胚胎发育而增强;CHP2 mRNA仅在肠、心、脑、皮、肝、肺等组织的某些阶段有少量表达,表达不稳定,表达趋势与胚胎发育过程关系不明显。CHP1在正常组织对照和恶性转化组织中均有表达,CHP2在恶性转化细胞中表达,而不在正常组织对照中表达。
结论:基因水平上,NHE调控因子CHP1的基因在胚胎发育期间广泛表达并呈现时间依赖性,CHP2基因表达局限并呈现组织特异性;蛋白水平上,CHP1表达广泛而CHP2一般只在恶性转化组织中表达。据此推论,CHP1是NHE功能的基本调节因子,而CHP2不是维持NHE功能的必需调节因子,并可能与NHE在肿瘤中的特殊功能相关,对CHP2与肿瘤关系的研究将对肿瘤发生机制和制药的研究有重要的意义。
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