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目的：本研究以大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型和大鼠脑血管内皮细胞(BMECs)缺氧模型为研究对象,研究补阳还五汤对MCAO大鼠NO、vWF、6-keto-PGF1α、PAI-1、tPA、ICAM-1、VCAM-1水平的影响(体内实验)及补阳还五汤含药血浆(DCP)和含药血清(DCS)对缺氧大鼠BMECs的作用(半体内实验),同时比较半体内实验与体内实验真实值的相似度,为中药血浆药理学学方法评价提供客观依据。方法：按照颈内动脉线栓法制备大鼠MCAO模型,用补阳还五汤进行干预,1、3、5、7天后观察神经症状积分,HE染色、TUNEL法观察脑组织病理形态改变,收集给药后1、3、5、7天的血浆,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定vWF、6-keto-PGF1α、PAI-1、tPA的含量,硝酸还原酶法检测NO含量,免疫蛋白印迹法(Western blot)检测脑组织中ICAM-1、 VCAM-1蛋白表达,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法(Real-time PCR)测定脑组织中ICAM-1mRNA、VCAM-1mRNA的表达。建立大鼠BMECs缺氧模型,分别用第1、3、5、7天的补阳还五汤DCP和DCS进行干预,检测指标和方法同体内实验。结果：(1)补阳还五汤组脑组织梗死范围、细胞凋亡率、神经症状积分均较模型组同时间点明显减少(P<0.01),梗死范围在给药后7天减少最明显(P<0.01),细胞凋亡率在给药后3天降低最明显(P<0.01),神经症状积分在给药后7天最低(P<0.01)。(2)给药后7天,依达拉奉组和补阳还五汤组NO表达水平均较模型组明显升高(均P<0.01),补阳还五汤组在给药后7天升高最明显(P<0.01)；给药后3、5、7天,依达拉奉组和补阳还五汤组vWF表达水平较模型组明显降低(均P<0.01),补阳还五汤组在给药后3天降低最明显(P<0.01)；补阳还五汤组在给药后7天6-keto-PGFla表达水平较模型组显著增加(P<0.01)；补阳还五汤组PAl-1表达在给药后3天比依达拉奉组明显降低(P<0.01)；依达拉奉组和补阳还五汤组tPA表达在给药后3、5、7天比假手术组明显降低(P<0.01)；依达拉奉组和补阳还五汤组ICAM-1mRNA、VCAM-1mRNA的表达在给药后1、3、5、7天比模型组均明显降低(P<0.01),补阳还五汤组在给药后7天降低最显著(P<0.01)；与依达拉奉组比较,补阳还五汤组大鼠脑组织ICAM-1蛋白表达在给药后7天明显降低(P<0.01)；与模型组比较,补阳还五汤组VCAM-1蛋白表达在给药后7天降至最低值(P<0.01)。(3)与模型组比较,第3、5、7天DCP组、第5、7天DCS组、依达拉奉组细胞NO表达明显增加(P<0.05),第7天升至最高值；与模型组比较,依达拉奉组、原药组、第3、5、7天DCP组、第1、3、5、7天DCS组vWF明显降低(P<0.05),第3天降至最低值；与模型组比较,依达拉奉组、原药组、第1、3、5、7天DCP组、第1、3、5、7天DCS组6-keto-PGF1α明显升高(P<0.05),第7天升至最高值；与模型组、空白血浆组比较,依达拉奉组、原药组、第3、5、7天DCP组PAl-1含量明显降低,差异显著(P<0.05),第3天PAI-1降低最显著；与模型组、空白血浆组、空白血清组比较,依达拉奉组、第1、5、7天DCP组、第1、5、7天DCS组tPA表达明显升高,原药组明显降低(P<0.05),第1天升高最显著；与原药组比较,第7天DCP组、第7天DCS组ICAM-1表达降低最显著(P<0.01)；与模型组、空白血浆组、空白血清组、依达拉奉组、原药组比较,第5、7天DCP组、第5、7天DCS组VCAM-1表达明显降低(P<0.05),第7d至最低值；与依达拉奉组比较,第5、7天DCP组、第5、7天DCS组ICAM-1mRNA、VCAM-1mRNA表达降低最显著(P<0.05),第7d至最低值。(4)补阳还五汤DCP和DCS均能明显降低缺氧培养的BMECs vWF的含量,升高NO、6-keto-PGF1α水平,与空白血浆、空白血清比较,差异有显著性(P<0.05)；DCP较DCS更显著降低PAl-1含量、增强tPA水平；DCP和DCS均能明显降低ICAM-1、VCAM-1、ICAM-1mRNA及VCAM.1mRNA的含量,与空白血浆、空白血清比较,差异有显著性(P<0.05)；DCP组vWF与体内实验相关系数高于DCS组,差异性有显著性(P<0.05)；DCP组NO、6-keto-PGF1α与体内实验相关系数接近于DCS组与体内实验相关系数,差异无显著性(p>0.05)；DCP组PAI-1、tPA、ICAM-1、VCAM-1. ICAM-1mRNA及VCAM-1mRNA与体内实验真实值各指标相关系数均高于DCS,差异有显著性(P<0.05)。结论：(1)补阳还五汤能明显降低局灶性脑缺血大鼠脑组织细胞凋亡率,在给药后3天降低最明显；减少梗死范围、改善神经症状积分,在给药后7天最显著。(2)补阳还五汤能明显升高tPA水平表达,在治疗后1天升高最明显；下调局灶性脑缺血大鼠血浆vWF、PAI-1含量,在治疗后3天降低最明显；上调NO、6-keto-PGF1α水平表达,降低ICAM-1、VCAM-1及其mRNA,在治疗后7天最明显。(3)补阳还五汤含药血浆或含药血清进行半体内实验时,检测指标tPA时,建议给药1d后取血合适；检测指标PAI-1时,给药3d后取血最佳；检测指标vWF时,给药3d后取血适宜；检测指标NO、6-keto-PGF1α、VCAM-1、ICAM-1及其mRNA时,给药7d后取血合适。(4)在半体内实验研究补阳还五汤对vWF、6-keto-PGF1α.PAI-1、tPA VCAM-1、ICAM-1及mRNA表达的影响时,建议优先选择血浆药理学方法,研究NO表达时,选择血浆药理学方法和血清药理学方法均可。