随着现代科学技术的进步,人们对手性药物的对映体通常具有不同的药理作用和生理活性有了更深的理解,获取光学纯单一异构体成为医药、食品、农业和环境等领域的研究热点。目前,高效液相色谱（HPLC）结合各种手性固定相（CSPs）已经发展成为直接分离对映体最快速、高效的方法之一。因此,开发具有高选择性和适用性的新型CSPs具有重要研究意义。本论文基于偶联小分子抗生素手性选择子提高其手性分离能力,制备出三种不同抗生素的新型手性固定相。在不同流动相下,对多种结构的手性化合物进行了拆分,评价了三种新型固定相的色谱分离性能,并初步探讨了其手性识别机理。第一章主要介绍了手性分离的意义和方法,归纳总结了高效液相色谱手性固定相的分类与应用,侧重大环抗生素类手性固定相的制备及研究进展。第二章以红霉素为手性选择剂,首次合成了键合型红霉素手性固定相（ECSP）。采用红外光谱（IR）、扫描电镜（SEM）、元素分析（EA）等表征新型固定相的结构和形貌。选取12种手性化合物作测试物,在正相条件下系统地评价了其色谱分离性能,对分离条件进行了优化,并对其手性识别机理进行了探讨。第三章以卡那霉素为手性选择剂,通过4,4’-二苯基甲基二异氰酸酯作偶联剂,制备了一种新的键合型卡那霉素手性固定相（KCSP）。在结构表征的基础上,对所合成的新型固定相进行了色谱评价。结果表明,所制备的KCSP适用于正相和反相两种分离模式,成功地拆分出24种结构不同的手性化合物,并进一步探讨其手性识别机理。第四章以链霉素为手性选择剂,以4-氯苯基异氰酸酯为衍生化试剂,采用化学键合法制备得到了键合型链霉素手性固定相（SCSP）。在正相条件下较系统地考察和评价新固定相的色谱分离能力,成功地拆分了禾草灵类、菊酯类手性药物,并对其手性拆分机理进行了初步探讨。综上,本文使用化学键合法制备了三种新型抗生素类手性固定相（ECSP、KCSP和SCSP）。考察了不同流动相下对手性化合物的拆分情况,探讨了其手性识别机理。研究结果表明,这类小分子抗生素作为一类新型HPLC-CSPs,具有一定的研究意义,也为新型手性色谱柱的深入开发和应用提供了新的思路与方法。