乳腺癌已成为中国女性患病率最高的癌症(17.1%)。然而癌细胞对化疗药物产生耐受性已然成为阻碍化疗成功的主要原因之一。长散在重复序列LINE-1是一种能够自主发生转座的逆转录转座元件,其在乳腺癌中的异常激活会促进乳腺癌基因组不稳定性,而基因组不稳定性不仅与肿瘤的发生和恶性进展密切相关,也是推动乳腺癌耐药性形成的重要原因之一,所以,探索LINE-1异常激活的原因,对于探索乳腺癌耐药性形成有重要现实意义。LINE-1启动子甲基化是抑制LINE-1表达的重要机制,但本实验室前期研究发现,短期紫杉醇处理乳腺癌细胞中LINE-1表达水平显著上升,而启动子的甲基化水平在药物处理前后无显著改变。鉴于DNA甲基转移酶DNMT3a存在的启动子途径和非启动子途径两种作用模式,本课题旨在探索DNMT3a是否能在乳腺癌细胞系中通过非启动子途径异常激活LINE-1。研究结果显示,在MDA-MB-231和MCF-7乳腺癌细胞中,DNMT3a能够结合于LINE-1基因内部,提高LINE-1基因内部DNMT3a结合区域内散在单个CpG二核苷甲基化的同时,激活LINE-1。此外,我们还证实,低浓度的PTX刺激MDA-MB-231乳腺癌细胞系,可诱导DNMT3a以相同的非启动子途径异常激活LINE-,提升细胞耐药指数。Kaplan-Meier数据库的临床预后分析进一步支持我们的实验结果,显示DNMT3a蛋白的高表达与接受化疗乳腺癌患者的不良预后显著相关,患者的总生存率和无复发转移生存率均显著降低。该研究初步探索了 LINE-1激活的一种新方式,证实DNMT3a介导的LINE-1基因内甲基化水平升高是LINE-1异常激活的重要机制,为探索肿瘤耐药机制及抑制肿瘤耐药提供了有意义的线索。