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当前纳米药物递送系统的研究依然是热点,将化疗药物载入纳米载体可以减轻药物的毒副作用、增加其水溶性、延长体内的循环时间、增加药物的疗效。本文利用去溶剂化-化学交联法制备了载阿霉素(DOX)和载藤黄酸(GA)的牛血清白蛋白纳米颗粒(BSA NPs),进行一系列的理化表征和优化,并对其进行体外和体内抗癌活性表征。论文主要工作如下:首先,利用去溶剂化-化学交联法制备了DOX-BSA NPs(DNP)和GA-BSA NPs(GNP)。利用minitab软件设计了2~3全因子实验,以载药量为指标,通过对实验结果进行软件分析,优化了DNP和GNP的制备工艺。体外药物释放实验表明,DNP和GNP具有酸性刺激响应性释放特性,表明能在肿瘤细胞内偏酸性环境下响应释放药物。其次,考察了DNP和GNP体外抗癌活性,实验结果表明DNP和GNP联合用药具有协同抗癌作用。首先考察了DOX和GA的细胞毒性。DOX和GA都能明显抑制HepG2肝癌细胞的存活。两药按照不同比例联用均有协同作用,当两药的联用比为1:1时具有最强的协同作用,联合指数(combination index,CI)为0.22。DOX和GA均能影响细胞周期,与对照组相比,DOX和GA作用细胞后,处于G2/M期的细胞数从7.73%分别上升到16.01%和10.22%,联合用药后比例从7.73%上升到21.36%,说明DOX和GA及其联合用药可以将细胞周期阻滞于G2/M期。空白BSA NPs几乎无细胞毒性。DNP和GNP联用具有协同抗癌活性,按药物比例1:1联合用药时有较强的协同作用,CI为0.38。最后,考察了DNP和GNP体内抗癌活性,进一步验证DNP和GNP联用治疗肿瘤的协同作用。药物在各器官的荧光图表明DOX在24 h后在各器官和肿瘤中基本代谢完全,而DNP在肿瘤部位的残留量与4 h相比上升。体内抗瘤实验表明DNP和GNP联合用药组对肿瘤的抑制作用最大,联合用药组剂量减小至1/3仍较单一用药的抗瘤效果更好,说明DNP和GNP的联合用药能增强抗肿瘤能力。从裸鼠体重变化实验中发现DNP和GNP全身毒性较低。HE染色图显示DNP和GNP及联合用药组相比DOX组、GA组有更多的肿瘤细胞坏死。DOX以及DNP对心、肝、脾有较明显的器官损害。肿瘤组织c-Caspase-3和ki-67染色表明GNP和DNP联合用药能诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖。综上所述,通过去溶剂化-化学交联法成功制备出了DNP和GNP。以载药量为指标,利用优化工艺制备出载药量较高的DNP和GNP,二者联合用药具有协同抑制肿瘤细胞存活的作用。体内实验也表明DNP和GNP联合用药能明显抑制肿瘤的生长,毒性较小。本文为进一步开发利用白蛋白纳米载药体系用于协同联合用药化疗提供了依据和基础,有潜在的应用前景。