本论文分别以北京油鸡、五指山小型猪肝脏提取的总RNA为模板,通过RT-PCR方法克隆目的基因片段到PGEM-T Easy载体上,构建北京油鸡PGEM-T-IL-15、PGEM-T-IL-18、PGEM-T-CRABP、PGEM-T-LPL、PGEM-T-TBP、PGEM-T-musclin、PGEM-T-L-FABP及五指山小型猪PGEM-T-L-FABP、PGEM-T-SLA-DQA的克隆载体。通过双酶切法分别构建北京油鸡、五指山小型猪pEGFP-N3-L-FABP真核表达载体,并在靶细胞中表达。实验结果如下:1.本实验克隆了北京油鸡IL-15、IL-18、CRABP、LPL、TBP、musclin、L-FABP基因和五指山小型猪L-FABP、SLA-DQA基因,并提交基因序列于GenBank获取收录号。2.本实验取阿勒泰羊耳缘组织采用组织块细胞贴壁培养法,成功的构建了靶细胞系,细胞冻存个体数达44个,冻存支数达210支,每支细胞含量为3～5×106细胞/ml。复苏后形态为典型成纤维细胞形态,根据建库要求对所建细胞系进行生物学分析,所得结果均符合ATCC的要求,为基因表达提供了优良的靶细胞。3.本实验采用XhoI、EcoRI双酶切法建立北京油鸡pEGFP-N3-L-FABP真核表达载体,并在靶细胞中表达。采用BamhI、XhoI双酶切法建立五指山小型猪pEGFP-N3-L-FABP真核表达载体,并在靶细胞中表达。为体细胞核移植转基因动物克隆奠定良好的基础。