实验目的:本论文基于地塞米松磷酸钠水溶液和氯化钙水溶液,采用离子键成胶策略构建一种安全、高效的原位可注射地塞米松超分子水凝胶用于葡萄膜炎的治疗.
　　实验方法:通过简单的物理混合地塞米松磷酸钠溶液(DexamethasoneSodiumPhosphate,Dex)和氯化钙溶液(CaCl2)获得一种基于药物分子自组装体系的超分子水凝胶(Dexhydrogel).采用傅里叶红外光谱仪(FourierTransformInfraredSpectrometer,FTIR)、X-射线衍射仪(X-raydiffract,XRD)、流变仪和透射电镜(TransmissionElectronMicroscope,TEM)对药物超分子水凝胶理化性能进行表征,考察不同组装浓度对于药物体外释放行为的影响.为了进一步考察该药物超分子水凝胶制剂的眼组织生物相容性,将6-8周SD(Sprague-Dawley)大鼠随机分为5组(n=6),其中2组右眼玻璃体腔分别注射30μgDex原药水溶液和30μgDex超分子水凝胶,另外2组右眼玻璃体腔分别注射15μgDex原药溶液和15μgDex水凝胶,1组右眼注射PBS作为阴性对照,体积均为3μL.所有大鼠的左眼作为正常对照不做任何处理,在术后1天、1周、1月分别采用视觉电生理(Electroretinogram,ERG)、眼底成像仪(MicronⅣ,PhoenixReserchLabs,USA)和苏木精-伊红(HematoxylinandEosinStaining,H&E)染色系统性评价其眼内生物相容性.为了考察其对非感染性葡萄膜炎的治疗作用,6-8周Lewis大鼠单侧后足垫皮下注射感光细胞间维生素A类结合蛋白多肽片段(IRBP1177-1191)主动免疫建立实验性自身免疫性葡萄膜炎(Experimentalautoimmuneuveitis,EAU)模型,在建模后第5天行玻璃体腔内注射药物治疗,并随机分为PBS组(阴性对照组),30μgDex组,30μgDex水凝胶组以及15μgDex组,15μgDex水凝胶组共5组(n=6),注射体积均为3μL.裂隙灯显微镜和苏木精-伊红染色(Hematoxylin-eosinStaining,HE)分别用于观察大鼠眼前节及眼后段炎症变化情况.于建模后第12天腹腔麻醉大鼠,处死后取眼球,分离角膜及晶状体,用ELISA法检测余下眼球组织中促炎因子IFN-γ、IL-17、IL-6及TNF-α的表达.
　　实验结果:本课题成功构建了一种基于Dex药物本身的离子型药物超分子水凝胶,并且可以在离子浓度改变时发生相的转变.理化性能的考察结果表明该水凝胶由典型的纳米纤维组成,钙离子和磷酸基团的之间的离子键是该水凝胶形成的主要驱动力,且药物浓度影响其释放行为.病理组织切片未见明显炎症反应,眼底照相、ERG的结果说明,Dex药物超分子水凝胶制剂可以减轻Dex单次玻璃体腔注射的毒副作用.裂隙灯显微镜和眼后段病理组织切片和TNF-α、IL-6以及IL-17等炎症因子的检测结果均显示,Dex药物超分子水凝胶制剂具有明显的抑制炎症的效果,且这种治疗效果存在剂量依赖效应.
　　实验结论:基于以上研究,我们将钙离子与Dex反应制备出原位可注射Dex超分子水凝胶,玻璃体腔注射具有良好的眼内生物相容性,有效降低了Dex的毒副作用,并能抑制EAU的炎症发生发展,为其作为Dex的另一剂型应用于临床提供了可能.