黄芪多糖结构与抗肿瘤活性研究

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本文以黄芪(Radix Astragalus)为原料,通过水提醇沉法提取多糖;酶-Sevag联合法除蛋白;无水乙醇洗涤去色素;乙醇分级沉淀、DEAE-Sephadex A-25和Sephadex G-100柱层析分离纯化后得到两种黄芪多糖APS-Ⅰ和APS-Ⅱ,苯酚硫酸法测定其糖含量分别为94.59%和97.57%。紫外光谱扫描测定结果表明,APS-Ⅰ和APS-Ⅱ都不含核酸和蛋白;旋光度测定分别为[a]DAPs-Ⅰ23℃=+185°(C,0.001g/mL, H2O)、[a]DAPs-Ⅱ23℃=+170°(C,0.001g/mL, H2O);高效液相色谱法测定APS-Ⅰ和APS-Ⅱ重均分子量分别为4.77×106和8.68×103Da。GC分析表明,多糖APS-Ⅰ和APS-Ⅱ主要由葡萄糖组成,还有少量的阿拉伯糖和木糖,其阿拉伯糖:木糖:葡萄糖的摩尔比分别为0.54:1:18.14和0.23:1:29.39;经红外光谱、甲基化分析、高碘酸氧化、Smith降解和核磁共振分析其多糖结构,结果表明,APS-Ⅰ和APS-Ⅱ的结构相似,为α-(1→3)连接葡聚糖,其中少量1→4、1→6连接的葡萄糖、阿拉伯糖和木糖以分支存在。APS-Ⅰ和APS-Ⅱ结构的差异在于分子量即糖链聚合度的不同。通过对小鼠H22腹水瘤抑制效果的比较、小鼠血清聚丙烯酰胺凝胶电泳和肿瘤组织切片观察等发现,APS-Ⅰ和APS-Ⅱ的抑瘤率分别为55.47%和47.72%, APS-Ⅰ的抑瘤效果要好于APS-Ⅱ;提示黄芪多糖抗肿瘤作用与其多糖结构存在一定的关系。
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