PHF2在乳腺癌中的表达及生物学功能研究

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目的探讨PHF2在乳腺癌细胞和乳腺癌组织中的表达情况及PHF2表达与乳腺癌临床病理特征、预后及生物学功能的关系。方法采用qPCR法检测乳腺癌及正常乳腺上皮细胞株HBL100,乳腺癌及配对癌旁组织中PHF2 mRNA的表达水平;Western blot法检测乳腺癌细胞株中PHF2蛋白的表达;免疫组化检测乳腺癌和癌旁组织中PHF2蛋白的表达,分析PHF2表达与乳腺癌临床病理特征的关系及预后的关系。通过腺病毒系统上调PHF2在MDA-MB-231和MCF-7中的表达后,采用CCK8、平板克隆形成、流式细胞周期测定、细胞划痕、Transwell方法检测PHF2上调对乳腺癌增殖、细胞周期、迁移、侵袭能力的影响;进一步,通过对裸鼠进行皮下成瘤,定期瘤内注射腺病毒,检测PHF2对乳腺癌增殖的影响。结果与正常人乳腺上皮细胞HBL100比较,PHF2 mRNA和蛋白水平在乳腺癌细胞株中((BT549,MDA-MB-231,MDA-MB-468,MCF-7,SK-BR-3,T47D))表达下调(P<0.01);与癌旁组织比较,PHF2 mRNA在90%(27/30)的乳腺癌组织中表达下调(P<0.05);在70%(35/50)的乳腺癌组织中PHF2蛋白表达下调(P<0.05);不仅如此,PHF2表达下调与乳腺癌患者的淋巴结转移、ER阴性及不良预后密切相关(P<0.05)。与对照组比较,上调PHF2可以抑制乳腺癌细胞MDA-MB231和MCF-7的增殖、迁移、侵袭能力(P<0.01);在体内实验中,上调PHF2后,可显著抑制肿瘤的增殖(P<0.05)。结论PHF2在乳腺癌细胞系和乳腺癌组织中表达均下调,并且PHF2表达下调与乳腺癌的不良预后显著相关,可以作为乳腺癌预后判断的一个指标,PHF2可能是乳腺癌治疗的一个潜在新靶点。
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