目的：研究三七总皂苷对肾脏损伤后细胞凋亡及凋亡调控基因的影响,探讨三七总皂苷对肾脏损伤的保护机制。方法：大鼠经轻度腹腔麻醉后,利用自由落体式生物撞击仪直接打击大鼠脊肋区制作肾脏创伤模型,打击股骨干中段制作骨折模型。实验动物分为五组,单纯创伤组(36只)、单纯骨折组(36只)、创伤给药组(36只)、骨折给药组(36只)、正常对照组(6只),前四组再平均分为6组,分别在打击后1、6、12、24、36、48小时各处死6只,给药组于创伤后即刻予以腹腔注射三七总皂苷(70mg/kg),骨折组,创伤组及对照组给予腹腔注射同等剂量的生理盐水。实验动物颈椎脱臼法处死后,迅速解剖动物,提取肾脏标本,中性福尔马林及4%多聚甲醛固定。HE染色观察创伤及骨折后肾脏组织的基本病理改变。采用免疫组化技术及原位杂交技术检测Bcl-2、Bax在肾脏组织中的表达规律,利用TUNEL技术观察凋亡细胞的变化及分布的规律性。结果：单纯创伤组：肾组织各层抑凋亡基因Bcl-2 mRNA转录均在创伤后即刻增加并持续到48h；抑凋亡因子Bcl-2蛋白表达在12h前均未升高,除髓质深层外,其余各层均从24h起明显升高。肾皮质浅层和皮质深层促凋亡基因Bax mRNA转录分别在12h、1h起增加,髓质层的转录在6h前减少,而在6h后开始升高；促凋亡因子Bax蛋白表达在肾皮质浅层于36h前未明显下降,皮质深层和髓质浅层分别在12h和24h前则明显下降,髓质深层在6h即开始升高直至48h。创伤给药组：肾组织各层抑凋亡基因Bcl-2mRNA转录在给药后即刻就明显增加且持续至48h,并在各时段对其进行双向性调控；抑凋亡因子Bcl-2蛋白表达在肾各层均全时段单向性升高,并在各时段进行双向性调控。给药后肾皮质层即刻减少促凋亡基因Bax mRNA转录并持续至48h,肾髓质层各时段均呈双向性调控,但其调节的幅度较低；肾组织各层促凋亡因子Bax蛋白表达在全时段均呈单向性下降直至48h,并在各时段进行双向性调控。单纯骨折组：肾组织各层抑凋亡基因Bcl-2 mRNA转录在骨折后即刻增加并持续到48h,且随时间的推移呈下降的趋势；肾组织各层抑凋亡因子Bcl-2蛋白表达在1h即明显升高至12h达高峰,但幅度较低。肾皮质浅层在骨折后36h增加促凋亡基因Bax mRNA转录,其余各层在1h起就明显增加并持续至48h；促凋亡因子Bax蛋白表达在肾皮质浅层和髓质深层于骨折后6h起明显升高,皮质深层和髓质浅层在12h前明显下降,24h后则明显升高。骨折给药组：肾皮质浅层抑凋亡基因Bcl-2 mRNA转录于给药后全时段进行适度的单向性增加并持续至48h,其余各层于给药后即刻适度增加并持续至48h,但随时间的推移呈下降的趋势,并在各时段对其进行交替式双向性调控；抑凋亡因子Bcl-2蛋白表达在肾组织各层于给药后全时段均呈单向性小幅度升高,并在各时段进行双向性调控。除髓质深层外,肾组织各层促凋亡基因Bax mRNA转录于骨折12h前增多,而在12h后减少；促凋亡因子Bax蛋白表达于12h前各时段呈双向性调控,在12h后各时段则呈较大幅度单向性下降并持续至48h。结论：1.创伤后,机体通过上调抗凋亡基因Bcl-2 mRNA转录及蛋白的表达,同时下调促凋亡因子Bax蛋白的表达,起到抑制肾组织细胞凋亡的作用。2.创伤后,机体通过上调促凋亡基因Bax mRNA转录,使皮质浅层、皮质深层及髓质层分别于12h、1h及6h启动对坏死组织及代谢产物的清除机制。3.三七总皂苷通过上调Bcl-2 mRNA的转录与蛋白的表达及下调Bax mRNA的转录与蛋白的表达而起到抑制细胞凋亡的作用。三七总皂苷的作用是通过对凋亡调节因子的单向性调节(全时段)及双向性调控(各时段)来共同完成的。另一方面,在三七总皂苷的作用下,机体髓质层于创伤后12h启动对创伤后肾脏坏死组织及代谢产物的清除机制。4.骨折后,机体通过显著上调抗凋亡基因Bcl-2 mRNA转录及蛋白的表达而起到抑制骨折后肾脏组织细胞凋亡的作用。同时,通过上调骨折后肾脏组织Bax mRNA的转录,即刻启动对肾脏坏死组织及代谢产物的清除机制,但是皮质浅层则发生在骨折后36h。5.三七总皂苷通过上调Bcl-2mRNA的转录及双向性调节Bcl-2蛋白的表达而起到抑制骨折后肾组织细胞凋亡的作用。同时,三七总皂苷通过调节Bax mRNA的转录使Bax蛋白的表达维持在一个适度平衡的状态下,从而起到调节骨折后肾脏组织细胞凋亡的作用。6.三七总皂苷通过有效调控Bcl-2/Bax的比率,使肾脏损伤后的细胞凋亡维持在一个适度平衡的状态,从而起到一个控制“凋亡开关”的作用。