背景:舌癌是最常见的口腔鳞状细胞癌,临床上常以手术结合药物对舌癌患者进行综合序列治疗。但目前临床传统化疗药物,如顺铂等(Cisplatin,CDDP),大多存在严重不良反应,加重患者痛苦。从提高抗肿瘤治疗疗效、降低毒副作用等角度,探索能够抗肿瘤增殖的新型天然生物活性药物,意义重大。茉莉酸甲酯(Methyl jasmonate,MEJA)作为自然界植物激素衍生物,已有多项国内外研究证实其可以对多种肿瘤细胞的增殖,产生抑制效应,同时毒副作用小,在肿瘤防治方面有着广阔的应用前景。本研究采用MEJA联合CDDP用药,对MEJA抑制人舌癌CAL-27细胞增殖效果,及相关机制进行初步探索。通过证实MEJA的抗肿瘤作用,为MEJA临床应用治疗舌癌提供新思路。目的:1.研究MEJA联合顺铂对人舌癌CAL-27细胞增殖的抑制作用。2.探讨MEJA联合顺铂诱导舌癌CAL-27细胞凋亡的相关机制。方法:1.将CAL-27细胞按设计分以下4组:空白对照组,MEJA单独用药组,CDDP单独用药组,MEJA+CDDP联合用药组;采用不同浓度的MEJA与CDDP,分别以不同作用时间,单独及联合作用于CAL-27细胞;应用倒置显微镜,观察细胞形态学变化;2.应用CCK-8法,检测各组CAL-27细胞增殖抑制率,并筛选合适的药物作用时间及浓度;3.采用Annexin VFITC/PI双染色法,检测各组细胞凋亡水平;流式细胞仪上机检测各组细胞凋亡水平;4.PCR法检测各组CAL-27细胞中Bcl-2、Caspase-3等肿瘤相关基因的mRNA表达水平。结果:1.倒置显微镜下,观察到空白对照组的细胞状态良好,而各浓度梯度MEJA组与CDDP组CAL-27细胞发生脱落解离,贴壁细胞变少,悬浮细胞变小变圆,细胞间距增大,胞内颗粒增多;在联合用药组,细胞上述形态学改变更为显著;2.CCK-8法检测结果提示:相对于空白对照组,MEJA组和CDDP组中,CAL-27细胞数量增殖抑制率升高;随着浓度梯度的增加,MEJA组与CDDP组增殖抑制率的上升趋势大致相同;而联合用药组增殖抑制率较单独用药组更高;各组均存在相应的剂量效应与时间效应;3.流式细胞术检测结果表明:MEJA组、CDDP组CAL-27细胞凋亡率较对照组高,而联合用药组CAL-27细胞凋亡率明显高于其他各组;4.PCR结果显示:相对对照组而言,MEJA组、CDDP组中,Bcl-2表达水平下降而Caspase-3表达水平上升,这一趋势在联合用药组中更为明显。结论:MEJA联合CDDP应用,能够对CAL-27细胞的增殖产生协同抑制,并可诱导其凋亡。其机制在于,MEJA能通过诱导细胞Bcl-2表达水平的下调和Caspase-3表达水平的上调,使CAL-27细胞发生增殖抑制和凋亡。