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MicroRNAs（miRNAs）在调节哺乳动物黑色素的生成和毛色形成方面有重要作用。短串联靶标模拟（Short tandem target mimic,STTM）是一种能够更有效地沉默植物miRNAs的技术,在动物细胞中很少应用。MiR-143-5p通过靶向TGF-β-activated kinase1（TAK1）调控羊驼黑色素细胞的迁移、增殖和黑色素的合成。为了发现miR-143-5p在黑色素细胞内可能存在其他路径影响黑色素细胞中黑色素的合成与转运,通过生物学分析和双荧光报告载体试验验证了肌球蛋白-Va基因（MYO5A）是miR-143-5p的靶基因之一。本试验使用STTM技术沉默miR-143-5p（STTM-miR-143-5p）的表达,运用实时荧光定量PCR、Western Blotting和Fontana-Masson染色等方法,对STTM-miR-143-5p表达载体转染后的小鼠黑色素细胞内相关基因的表达以及黑色素颗粒生成和分布等方面进行检测,主要内容和结果如下:1.在293T细胞中共转染MYO5A的双荧光报告载体和STTM-miR-143-5p过表达载体,转染组的双荧光素酶活性是对照组的1.334倍,呈极显著差异（P<0.001）。2.在小鼠黑色素细胞中,过表达STTM-miR-143-5p质粒后,通过实时荧光定量PCR检测相关基因的表达水平发现MYO5A、MLPH、Rab27a、MITF、TYR和TYRP1基因在转染组中mRNA表达水平比对照组明显上调,而TYRP2基因在转染组中mRNA水平是对照组的0.583倍,呈极显著差异（P<0.05,P<0.01,P<0.001）。3.在小鼠黑色素细胞中,过表达STTM-miR-143-5p质粒后,通过Western Blotting法检测相关基因在蛋白表达水平的变化,结果显示:STTM-miR-143-5p过表达上调了MYO5A、MLPH、Rab27a、MITF、TYR和TYRP1基因在蛋白水平的表达,而TYRP2基因在转染组中蛋白水平是对照组的0.550倍,呈极显著差异（P<0.01,P<0.001）。4.在小鼠黑色素细胞中,过表达STTM-miR-143-5p质粒后,总黑色素和褐黑色素在转染组中含量明显高于对照组,而真黑色素在转染组的含量是对照组的0.919倍（P<0.05,P<0.01）。5.在共培养的小鼠黑色素细胞和角质形成细胞中,过表达STTM-miR-143-5p质粒后,通过Fontana-Masson染色法发现,转染组的黑色素细胞胞质和树突内黑色素颗粒含量均明显增多,并对角质形成细胞内的黑色素颗粒进行统计,得出在角质形成细胞内转染组的黑色素颗粒远多于对照组,呈极显著差异（P<0.001）。结论:STTM-miR-143-5p通过靶向结合MYO5A,调控MLPH、Rab27a、MITF、TYR、TYRP1和TYRP2基因的表达,从而调控了总黑素和褐黑素合成的变化以及黑色素的转运。同时,该结果也为STTM能够有效沉默动物细胞中的miRNAs提供依据。