论文部分内容阅读
目的:1.建立一种超高液相色谱(Ultrahigh pressure liquid chromatography, UPLC)紫外和荧光检测法，测定血浆中甲氨蝶呤（Methotraxate, MTX）、亚叶酸(Calcium Folinate,CF)、5-甲基四氢叶酸(5-methyltetrahydrofolate,5-MTHF)的血药浓度的方法。2.研究儿童急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia, ALL)患儿,使用大剂量MTX后，MTX给药剂量及血浆中MTX、CF和5-MTHF浓度变化特点与不良反应发生率的关系。方法:1.MTX以C18色谱柱分离，流动相为乙腈-40mol.L-1磷酸二氢钾缓冲液(93：7，缓冲液用磷酸调pH=4.5)，紫外检测（波长为304nm），标准曲线法定量；CF和5-MTHF以C18色谱柱分离，流动相为乙腈-40mol.L-1磷酸二氢钾缓冲液(93：7，缓冲液用磷酸调pH=4.5)，荧光检测器（激发波长为297nm，发射波长为303nm），标准曲线法定量。2.用含EDTA抗凝剂的试管收集70例ALL患儿静脉血，离心3分钟分离血浆。用UPLC法测定血浆中MTX、CF和5-MTHF浓度，利用SPSS19.0统计软件包所得数据进行统计学分析。结果：1.MTX、 CF、5MTHF保留时间分别为2.193，2.878，3.448min;检测限分别为0.5,0.05,0.05mg/L; MTX、CF、5MTHF线性关系良好, r2分别为0.9998、0.9998、0.9990(n=6);各种浓度的回收率、日内及日间精密度均符合方法学要求。2.利用χ2检验对表5中不良反应发生率进行相关性分析，我们发现试验①中不良反应发生率的比较无统计学意义(X2=0.046，p=0.830)，试验②中不良反应发生率的比较提示差异有统计学意义(X2=10.621，p=0.001)；。结论：1. UPLC法测定儿童血浆中MTX、亚叶酸及5-甲基四氢叶酸的浓度时结果稳定,重现性好,可以用于临床大剂量MTX化疗后患儿体内血浆药物浓度监测。2.患儿不良反应发生率与MTX血药浓度有关，与MTX使用剂量无关。3. CF及5-MCHF血药浓度与不良反应发生率差异无显著性。