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用MRS平板从健康仔猪消化道不同部位（胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠和直肠）分离纯化出231株菌，耐酸试验快速筛选出26株耐酸性好的菌株。传统的碳水化合物发酵方法鉴定这26株乳酸杆菌属于：罗伊氏乳杆菌（Lactobacillus reuteri）6株、食淀粉乳杆菌（Lactobacillus amylovorus）7株、嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）1株、唾液乳杆菌（Lactobacillus salivarius）3株、植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）9株，而根据16S rRNA基因测序结果鉴定为：罗伊氏乳杆菌（Lactobacillus reuteri）10株、约氏乳杆菌（Lactobacillus johnsonii）15株、类肠膜魏斯氏菌（Weissella paremesenteroides）1株。26株乳杆菌中有6株菌（ZB3、WN8、WN1、SNQ5、SBZ5、JJB3）对致病性大肠杆菌O8和沙门氏菌339都有很好的抑制作用，抑菌圈大于18 mm，起主要抑菌效果的是代谢产生的有机酸。6株乳杆菌能耐受0.3-0.9％的胆盐和50℃的温度。筛选出抗逆性和抗菌性都很优良的两株菌：SBZ5和JJB3。用利福平MRS平板将这两株菌驯化成耐利福平变种，应用于断奶仔猪饲喂试验。选取28日龄断奶仔猪共72头，随机分成3组，每组3个重复。对照组饲喂基础日粮；一组添加乳酸杆菌JJB3-R；一组添加乳杆菌SBZ5-R，添加量1.5×109 CFU／kg饲料，饲喂21 d。与对照组相比，乳杆菌JJB3-R组显著提高平均日增重达34.93％，SBZ5-R组提高日增重达21.71％，说明乳酸杆菌JJB3-R和SBZ5-R促进断奶仔猪的生长；JJB3-R组显著提高平均日采食量达28.98％，SBZ5-R组提高平均日采食量达15.72％；JJB3-R组极显著提高饲料转化率，SBZ5-R组显著提高饲料转化率。乳酸杆菌JJB3-R和SBZ5-R明显降低断奶仔猪的腹泻率。乳酸杆菌JJB3-R和SBZ5-R组粪便中乳酸杆菌、双歧杆菌的数量增加，大肠杆菌的数量减少。通过检测粪便中耐利福平乳杆菌的数量来监测饲喂的乳酸杆菌通过消化道后的存活情况：SBZ5-R组的粪便中检测到的耐利福平乳杆菌占总乳杆菌的2.57％-45.47％；JJB-R组的粪便中的耐利福平乳杆菌占总乳杆菌的12.71％-35.29％。约氏乳酸杆菌JJB3和SBZ5具有良好的抗逆性和抗菌性能，它们能促进仔猪生长，提高日增重，控制腹泻。约氏乳酸杆菌JJB3的应用效果优于SBZ5，这两株菌可作为益生乳酸杆菌应用于断奶仔猪生产。