在体评价基质细胞衍生因子-1靶向微泡在AMI干细胞移植中的作用

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目的:探讨携带基质细胞衍生因子-1(SDF-1)单克隆抗体的靶向微泡在体定量评价猪梗死心肌SDF-1表达量的可行性,及无创评价SDF-1靶向微泡筛选猪心肌梗死后经冠状动脉移植骨髓间充质干细胞(MSCs)归巢最佳时间窗的作用。方法:应用生物素-亲和素桥接法制备携带SDF-1的靶向超声微泡。39头实验小型猪,随机抽取3头作为对照组,余36头接受开胸手术,统一结扎左前降支50%位点处50分钟后打开活结,制备缺血再灌注模型。将造模成功的36头实验猪根据术后1天、3天、1周、2周、3周、4周6个时间点随机分为6组(n=6头),其中随机取3头接受靶向和非靶向超声造影检查,经软件分析获得靶向造影剂心肌灌注参数AT、βT、A×βT和普通造影剂心肌灌注参数AC、βC、A×βC,检查结束后即刻处死动物取心脏,选取超声感兴趣区相应的心肌组织进行SDF-1含量的分子生物学检测;每个时间组剩余的3只动物接受介入手术,经冠状动脉注射BrdU标记的骨髓间充质干细胞(MSCs),于移植3小时后处死动物,计数心肌梗死区MSCs的归巢量。结果:所有模型猪的心尖、左前壁、前间壁均有充盈缺损区。在同一时间组内,靶向造影剂灌注参数AT、βT、(A×β)T大于普通造影剂AC、βC、(A×β)C(P<0.05)。在不同时间组之间比较非靶向造影剂灌注参数无差异;而靶向造影剂灌注参数两两比较均有差异(P<0.05),并与梗死心肌组织SDF-1的表达量及移植干细胞心肌归巢数量变化趋势一致,三者均于1w达峰值(P<0.05)。相关性分析,普通造影剂心肌灌注参数AC和(A×β)C与梗死心肌SDF-1表达量具有相关性(r=0.547,0.506,P均<0.05);靶向造影剂灌注参数AT、βT、(A×β)T与梗死心肌SDF-1表达量均具有相关性(r=0.887,0.892,0.942,P均<0.01),同时与干细胞的心肌归巢数量也具有相关性(r=0.658,0.778,0.777,P均<0.05);且AT(X)、βT(X)、(A×β)T(X)分别与梗死心肌SDF-1表达量(Y)建立回归方程Y=0.699X-0.6048、Y=0.4698X+0.3282、Y=0.0945X+0.6685(R2=0.772,0.7957,0.8871,P均<0.01);βT(X)和(A×β)T(X)分别与干细胞归巢数量(Y)建立回归方程Y=36.11+17.601X(R2=0.605,P<0.05)和Y=50.023+3.348X(R2=0.604,P<0.05)。结论:急性心肌梗死后1周为移植干细胞的最佳时间窗。SDF-1靶向造影剂可以在体定量分析梗死心肌SDF-1的表达量及预测移植干细胞的心肌归巢数量。
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