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目的1本课题旨在检测三阴性和非三阴性乳腺癌中miR-615-3p的表达水平,研究其对乳腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响。2鉴定miR-615-3p的靶基因,并研究其靶基因对乳腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法1 RT-q PCR法检测miR-615-3p在三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231、非三阴性乳腺癌细胞系MCF-7及临床乳腺癌标本(三阴性乳腺癌及非三阴性乳腺癌)中的表达水平。2 MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞分别敲低和过表达miR-615-3p,24 h后采用CCK-8、平板克隆实验、Transwell迁移和侵袭实验分别检测miR-615-3p对乳腺癌细胞活性、增殖和侵袭能力的影响。3通过生物信息学方法筛选miR-615-3p可能的靶基因;并用RT-q PCR、Western blot和双荧光素酶报告实验分析miR-615-3p对其靶基因的调控作用。此外,采用RT-q PCR、Western blot和免疫组织化学法检测其靶基因在乳腺癌细胞系和乳腺癌标本中的表达水平。4 MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞分别敲低和过表达miR-615-3p的靶基因,24 h后采用CCK-8、平板克隆和Transwell迁移和侵袭实验检测靶基因对乳腺癌细胞的活性、增殖和侵袭的影响。结果1 miR-615-3p在非三阴性的MCF-7细胞中的表达水平显著高于三阴性的MDA-MB-231细胞(P<0.05);miR-615-3p在非三阴乳腺癌标本中的水平显著高于三阴性乳腺癌标本(P<0.05)。2与对照组相比,敲低miR-615-3p的MCF-7细胞活性显著增强(P<0.05),克隆形成数、穿过基底膜(无基质胶和有基质胶)的细胞数均显著增多(P<0.01);与对照组相比,过表达miR-615-3p的MDA-MB-231细胞活性显著降低(P<0.05),克隆形成数、穿过基底膜(无基质胶和有基质胶)的细胞数均显著减少(P<0.05)。结果显示miR-615-3p水平降低可促进乳腺癌细胞的增殖和侵袭,反之miR-615-3p水平升高可抑制乳腺癌细胞的增殖和侵袭。3生物信息学分析提示β-1,4-半乳糖基转移酶1(beta-1,4-galactosyltransferase 1,B4GALT1)可能为miR-615-3p的靶基因。双荧光素酶报告实验证实miR-615-3p直接调控B4GALT1的表达(P<0.001)。MCF-7细胞中敲低miR-615-3p可导致B4GALT1的m RNA和蛋白水平均被显著下调(P<0.05);MDA-MB-231细胞中过表达miR-615-3p可导致B4GALT1的m RNA和蛋白水平均被显著上调(P<0.01)。以上结果提示乳腺癌细胞中B4GALT1是miR-615-3p的直接靶基因,受其正向调控。4 B4GALT1在非三阴性的MCF-7细胞中的表达水平显著高于三阴性的MDA-MB-231细胞(P<0.05);B4GALT1在非三阴性的乳腺癌标本中的水平显著高于三阴性的乳腺癌标本(P<0.05)。5与对照组相比,B4GALT1敲低的MCF-7细胞的活性显著降低(P<0.05),克隆形成数和穿过基底膜的细胞数(无基质胶、有基质胶)均显著减少(P<0.05);与对照组相比,过表达B4GALT1的MDA-MB-231细胞的活性也被显著下调(P<0.01),克隆形成数和穿过基底膜的细胞数(无基质胶、有基质胶)均显著减少(P<0.05)。结果显示敲低和过表达B4GALT1均可抑制乳腺癌细胞的活性、增殖和侵袭。结论1 miR-615-3p和B4GALT1在三阴性乳腺癌中的表达水平显著低于非三阴性乳腺癌。2在三阴和非三阴性乳腺癌中,B4GALT1均是miR-615-3p的直接的正向调控的靶基因。3 miR-615-3p可负向调控乳腺癌细胞(三阴和非三阴性)的增殖和侵袭能力。4乳腺癌细胞中,B4GALT1负向调控三阴性乳腺癌细胞的增殖和侵袭能力,但正向调控非三阴性乳腺癌细胞的增殖和侵袭能力。