生理状况下,血管内皮通过生成和释放内皮源性的舒张因子,如一氧化氮（nitric oxide, NO）、前列环素（prostacyclin, PGI₂）及内皮源性超极化因子（endothelium-derived hyperpolarizing factor, EDHF）,在维持血管稳态方面起着重要的作用。它们和内皮素﹑血栓素A₂ （TXA₂）等血管收缩因子共同作用,调节血管局部的紧张程度和血流量,其中NO和PGI₂发现较早,其性质和作用机制均得到广泛而且深入的研究,但有关EDHF,尤其是EDHF在脑血管中的作用研究还很少。硫化氢（H₂S）长期以来一直是被看成是对机体有害的气体分子。研究表明H₂S是机体气体信号家族中的重要的一员,与NO、一氧化碳（CO）一起被称为“三人执政”。在哺乳动物细胞中,合成H₂S的酶主要有胱硫醚-β-合成酶（cystathionine-β-synthase, CBS）和胱硫醚-γ-裂解酶（cystathionine-γ-lyase, CSE）。现普遍认为CSE是心血管系统中产生H₂S的唯一的酶。在血管中,CSE不仅在血管平滑肌细胞中表达,在血管内皮细胞中也有表达。本文现对H₂S在大鼠大脑中动脉（middle cerebral artery, MCA）中是否具有EDHF样作用进行了研究。目的:1.探讨H₂S是否介导大鼠MCA中EDHF舒张反应。2.探讨脑缺血再灌注大鼠MCA中EDHF舒张反应的变化。方法:1.采用离体血管舒缩功能测定实验方法,检测乙酰胆碱（ACh）﹑硫氢化钠（NaHS）、L-半胱氨酸（L-Cys）等对大鼠离体MCA的舒张作用,并分别观察四乙胺(TEA, 1×10^-3 mol/L)对NaHS舒张大鼠MCA作用的影响及去内皮和DL-炔丙基甘氨酸(PPG, 1×10^-4mol/L)对L-Cys舒张大鼠MCA作用的影响。血管用一氧化氮（NO）合酶抑制剂(L-NAME,3×10^-5 mol/L)和前列环素（PGI₂）合酶抑制剂(Indo,1×10^-5 mol/L)预处理后,用ACh诱导血管产生非NO、非PGI₂舒张反应,并分别观察TEA(1×10^-3 mol/L)或PPG(1×10^-4mol/L)对这种非NO、非PGI₂舒张反应的影响。2.运用胶原酶Ⅱ等消化大鼠MCAs获取混合细胞悬液,磁珠分离法（magnetic cell separation system）分离纯化大鼠MCAs内皮细胞,采用RT-PCR的方法检测正常大鼠MCAs内皮细胞中内源性H₂S合酶—CSEmRNA的表达。3.采用线栓法复制局灶性脑缺血（MCAO）再灌注损伤模型,观察大鼠神经功能缺陷,检测脑梗死体积和脑组织中H₂S含量的变化及EDHF介导的血管舒张反应的变化。并用RT-PCR的方法检测脑缺血再灌注过程中CSEmRNA的表达的变化。结果:1.在KCl （30 mmol/L）预收缩的大鼠MCA环上, ACh (10^-7～10^-4.5 mol/L)可浓度依赖性舒张大鼠MCA,血管用L-NAME (3×10^-5mol/L)和Indo (10^-5 mol/L)预处理后, ACh对MCA仍具有舒张作用。但钙激活钾通道(K_Ca通道)阻断剂四乙胺(TEA, 1×10^-3 mol/L)或CSE（内源性H₂S合酶）抑制剂PPG(1×10^-4 mol/L)可明显取消这种MCA的舒张。NaHS (10^-5～10-2.5 mol/L,H₂S供体)也可浓度依赖性舒张MCA,但可被1×10^-3 mol/L TEA显著地抑制;L-Cys (10^-5～10^-2.5 mol/L,CSE底物)也可诱导MCA舒张,但PPG(1×10^-4 mol/L)或去除血管内皮可显著抑制L-Cys的这种舒张作用。。2.采用磁珠分离法分离纯化得到大鼠MCAs内皮细胞,运用RT-PCR的方法检测结果显示大鼠MCAs内皮细胞上有CSEmRNA条带的表达。3.在脑缺血再灌注损伤中,大鼠MCA中EDHF介导的舒张反应明显增强,大鼠MCA内皮细胞中CSEmRNA表达上调,大鼠脑组织H₂S含量显著增多。结论:1.在大鼠MCA中,ACh诱导的非NO、非PGI₂舒张反应,即EDHF反应可能是H₂S介导的。2.脑缺血再灌注大鼠MCA中EDHF介导的舒张反应明显增强。