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目的研究大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单孢菌和鲍曼不动杆菌等5种细菌的药物敏感谱系,并针对质粒编码的β-内酰胺酶类耐药基因的携带和分布情况进行PCR检测,旨在积累临床病原菌耐药性变异的素材,建立特异性及早筛检方法,为临床合理使用抗生素治疗多重耐药性细菌感染提供参考。方法利用VITEK 2 Compact全自动微生物系统,以及革兰氏染色、糖发酵试验、靛基质(Imdole)反应实验、VP试验、血浆凝固酶试验等常规鉴定法对医院获得的多株病原菌进行种属鉴定。选择了21种抗生素纸片,对临床分离、初步鉴定的5种细菌进行药敏试验。针对质粒编码的β内酰胺酶类耐药基因进行设计特异性引物,采用聚合酶链反应(PCR)扩增TEM1、CTX M、KPC、Staphy、NDM、SHV、CMY、DHA、VIM、OXA1、OXA2等基因的特异性靶序列。扩增的PCR产物在1%的琼脂糖凝胶上电泳检测,进行特异性基因片段的验证。结果从泰安地区某医院检验科分离并鉴定出大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌等5种319株病原菌。药敏试验结果发现:大肠埃希菌和鲍曼不动杆菌对青霉素(PEN)、苯唑西林(OXA)、头孢唑林(CFZ)、克林霉素(CLI)、万古霉素(VAN)、庆大霉素(GEN)、四环素(TET)等的耐药率较高,耐药率分别在66.0%~94.1%之间,而大肠杆菌对拉氧头孢(MOX)和呋喃妥因(AHD)的耐药率稍低,耐药率在28.0%左右,鲍曼不动杆菌对头孢呋辛(CXM)和阿奇霉素(AZM)的耐药率较低,耐药率在33.0%左右;金黄色葡萄球菌除对米诺环素(MNO)、氯霉素(CHL)和呋喃妥因(AHD)等3中抗生素的耐药性在31.5%~47.9%之间(≤50%)以外,对其他18种抗生素均有较高的耐药性(耐药率≥56.2%);铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌对青霉素(PEN)、苯唑西林(OXA)、阿莫西林(AMX)、克林霉素(CLI)、万古霉素(VAN)、米诺环素(MNO)耐药率较高,耐药率在67.6%~98.4%之间,而铜绿假单胞菌对拉氧头孢(MOX)和磺胺甲基异恶唑(SMZ)的耐药率较低,在22.2%~30.2%之间,肺炎克雷伯菌对头孢吡肟(FEP)、美洛培南(MEM)、拉氧头孢(MOX)和阿奇霉素(AZM)的耐药率较低,耐药率在22.1%~26.5%之间。PCR结果显示:5种细菌菌株中有携带TEM1、CTX M、KPC、Staphy、NDM、SHV、CMY、DHA、VIM、OXA1、OXA2等产β-内酰胺酶类的质粒,筛得大肠埃希菌E0023,鲍曼不动杆菌A0042,肺炎克雷伯菌K0068,铜绿假单孢菌P0061,金黄色葡萄球菌S0034等5株多重耐药菌。结论临床分离鉴定的5种病原菌耐药谱系呈现种内、种间的复杂多样性,而且存在TEM1、CTX M、KPC、Staphy、NDM、SHV、CMY、DHA、VIM、OXA1、OXA2等基因的不同组合式多重耐药现象。