论文部分内容阅读
鹿茸是我国传统的名贵中药,含有多种活性成分,主要包括氨基酸、蛋白质多肽类、激素样物质、多糖、核酸以及各种无机元素等。鹿茸对治疗心血管和外周及中枢神经系统疾病、增强免疫能力、抗炎以及抗肿瘤等方面均有作用。鹿茸及鹿茸产品的功效与其自身的化学成分密不可分。鹿茸中的多糖和胶原作为其成分的主要组成物质,在鹿茸生理功能方面发挥巨大作用。近年来对多糖和胶原两种生物大分子的提取方法及性质有过一些研究,但针对鹿茸多糖和胶原的相关研究相对较少。本文以东北梅花鹿茸为原料,对鹿茸中的多糖及胶原的提取工艺、分离纯化技术、性质及二者交联后生物材料的性质进行了以下几方面的研究:1.比较不同生长阶段鹿茸多糖(PAPS)含量的差异性,并对其提取条件进行优化。采用超声波辅助提取法提取鹿茸多糖,并用Box-Behnken中心组合试验设计优化提取条件。不同生长阶段的鹿茸中二杠茸多糖含量最多,为16.38mg/g,最优条件下二杠鹿茸中多糖得率为0.98%。2.鹿茸多糖分离纯化和性质研究。粗多糖经DEAE-52离子交换层析和SepharoseCL-6B凝胶排阻层析洗脱后,分离得到单一多糖组分PAPS3a。采用紫外扫描(UV)、傅里叶红外扫描(FTIR)、高效液相色谱(HPLC)和气相色谱-质谱(GC-MS)联用等技术对其性质和组成进行研究。测定了PAPS3a纯度、相对分子质量及单糖组成等性质。3.采用胃蛋白酶法提取胶原,比较不同生长阶段鹿茸中胶原含量及胶原提取效果,采用Box-Behnken中心组合试验设计优化胶原提取条件。二杠茸中胶原含量高于毛桃茸和三权茸,为65.8mg/g。最优条件下鹿茸胶原得率为5.92%。4.通过紫外扫描(UV)、傅立叶红外光谱(FTIR),氨基酸组成测定,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和差示量热扫描(DSC)等方法对鹿茸胶原性质进行分析。结果表明胶原纯度较高,在230nm处有强吸收峰,具有三螺旋结构和典型胶原的氨基酸组成,符合Ⅰ型胶原特征。氨基酸分析说明其差示量热扫描测得其热收缩温度为84.05℃。5.采用EDC/NHS交联剂对鹿茸中已提取的多糖和胶原两种生物活性物质进行了化学交联,并对材料的吸水率、透光率、力学性能、体外降解率及表面结构等性质做了进一步分析。结果表明交联生物材料的各种性能均比单纯的胶原膜有所改善,多糖与胶原两种高分子材料具有良好的相容性,分子间的相互作用力使交联材料具有良好的吸水性,较高的透光率,比单一膜更好的力学性能,更强的耐酶解能力和光滑均一的表面结构。