论文部分内容阅读
目的:阿霉素是目前临床上常用的蒽醌类抗肿瘤药物之一,对多种肿瘤具有良好的疗效。但是,阿霉素能引起严重的心脏毒性反应,是限制其临床应用的主要原因。本文旨在评价三七皂苷（PNS）抗阿霉素毒性的心脏保护作用,及其对阿霉素抗肿瘤作用的影响,为利用传统中药三七防治阿霉素心脏病提供科学依据。方法:1.采用单次15 mg·kg-1腹腔注射阿霉素造成小鼠急性心脏毒性模型,通过测定心室内压、血清心肌酶谱、组织抗氧化酶活力及高能磷酸物质含量、组织和心肌细胞超微结构等多方面的指标,综合评价PNS抗阿霉素心脏毒性的作用。2.采用大鼠心肌细胞株H9C2,观察阿霉素对心肌细胞活力的影响,以及PNS及相关化合物对心肌细胞的保护作用。以荧光探针Carboxy-H2DCFDA和JC-1,考察PNS活性成分对细胞内活性氧自由基（ROS）和线粒体膜电位的影响。3.用移植性小鼠荷瘤模型及体外培养的人源肿瘤细胞,考察PNS对阿霉素的抗肿瘤作用以及影响。结果:1.15 mg·kg-1腹腔注射阿霉素72h后,动物心脏左室功能显著下降;血清心肌酶谱指标（LDH、CK、CKMB）水平大幅提高;心肌组织结构破坏,心肌线粒体变形萎缩,肌纤维溶解;腺苷酸能荷明显下降。预先5天连续给予100mg·kg-1PNS可以抑制左室功能的下降,使+dp·dt-1max、-dp·dt-1max、LVSP相对模型组分别变化了49.5%、54.9%、19.8%;血清心肌酶谱指标LDH、CK、CKMB为模型组的44.2%、39.5%、36.0%;腺苷酸能荷为模型组的29.4%;心肌组织和细胞超微结构的破坏显著减轻。PNS在25～100 mg·kg-1给药浓度范围内,对心肌组织显示剂量相关的保护作用。组织抗氧化酶SOD、CAT、GSH-px水平分别较模型组提高17.6%、32.1%、17.0%。说明PNS对阿霉素引起的心脏毒性具有确切的保护作用。2.以MTT法测定发现,10μM阿霉素处理心肌细胞H9C2 24h后,细胞活力下降了20%。预先给予PNS(6.25～100 mg·L-1)能提高细胞活力。PNS的相关化合物中,三七皂苷R1和人参皂苷Rg3显示最强的保护作用。Rg3能显著抑制阿霉素诱导的细胞内ROS水平升高,减轻线粒体膜电位降低的趋势。在黄嘌呤-黄嘌呤过氧化物酶体系中,PNS并未显示直接清除超氧阴离子自由基的作用。3.隔日腹腔注射2 mg·kg-1盐酸阿霉素对小鼠S180肉瘤的抑制率达到49.6%,同时每日灌胃给予25、50、100mg·kg-1的PNS,抑瘤率分别为45.8～61.2%,与前者并无统计学差异。PNS在6.25～100 mg·L-1浓度范围内,对阿霉素抑制人源肿瘤细胞KB、MCF-7、K562增殖的作用没有影响。结论:PNS对阿霉素引起的心脏毒性具有明显的保护作用,且对阿霉素的抗肿瘤作用没有影响,提示PNS可能作为抗阿霉素毒性的心脏保护剂。