磷脂具有良好的应用前景,但天然磷脂结构单一、含量低且种类较少。改性磷脂来源广泛、种类多、功能性强,成为近几年关注的焦点。酶改性则是一种高效温和的磷脂改性方法,其中磷脂酶D是一类特殊的酯键水解酶,在一定的条件下,它能水解磷脂生成磷脂酸和羟基化合物,并能催化某些含羟基的化合物结合到磷脂的酰基上,生成许多稀有磷脂和半合成磷脂,满足食品和医药等领域的需要。磷脂酶D广泛存在于微生物、植物、动物中,特别是来源于微生物的磷脂酶D,表现出很好的转酯能力和水解能力。实验室从土壤中筛选菌株,通过菌落水解圈法对菌种进行自然选育,并摇瓶复筛得到一株产磷脂酶D的菌株P1,目的菌株P1是革兰氏阳性、兼性厌氧、芽孢边端生的棒状杆菌。菌体长1.8-2.4μm,宽0.8-1.0μm;菌落呈黄白色,表面粗糙,中间隆起,边缘整齐。通过16S rRNA序列比对分析,该菌株与Bacillus cereus相似度为99.73%。最适生长条件:温度30℃,pH 6.0-7.0,不耐盐;其他各项生理生化鉴定结果与模式菌株基本一致;主要磷脂组分为磷脂酰乙醇胺PE和磷脂酰胆碱PC;G+C含量为42.01 mol%。菌株P1属于芽孢杆菌属Bacillus,并命名为Bacillus sp.P1。同时建立了一种利用雷氏盐检测磷脂酶D活性的方法,并对该方法进行优化,优化的检测条件为:检测波长526nm,酶反应时间10 min,雷氏盐浓度3%,与雷氏盐反应时间10 min。并从分子方向着手,找到与产磷脂酶D相关的全长基因,设计引物,构建克隆载体,验证成功后,构建产磷脂酶D相关基因的表达载体。